Caracterização molecular do inibidor da proteína serina/treonina fosfatase 1 (PP1) de Neurospora crassa

• Processo: 01/11490-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2002
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Aline Maria da Silva
• Beneficiário: Daniela Beton
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Clonagem Serina Treonina Inibidores Holoenzimas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Clonagem | Inibidor | Proteina Fosfatase

Resumo

A proteína serina/treonina fosfatase do tipo 1 (PP1) é uma enzima ubíqua nas células e tecidos de diversos organismos e que existe como dímero constituído de uma subunidade catalítica (PP1c) e uma subunidade regulatória. A diversidade funcional da PP1 é atribuída às distintas subunidades regulatórias que compõem a holoenzima, que conferem especificidade e/ou modulam a atividade da subunidade catalítica. Recentemente, identificamos em extratos de N. crassa uma fração inibitória específica para PP1c, a qual purificamos até homogeneidade e denominamos INc-1. A partir de seqüências de aminoácidos parciais do INc-1 foi identificada uma ORF (open reading frame) no genoma de N. crassa cuja seqüência de aminoácidos é similar ao inibidor-2 de mamíferos, em especial em regiões identificadas como importantes para associação com a PP1c. Neste projeto temos como objetivos isolar e caracterizar o gene que codifica para o inibidor da PP1c de N.crassa (INc-1) e obter a proteína recombinante expressa em bactérias. A proteína recombinante será testada quanto a sua capacidade de inibição da PP1c recombinante expressa em bactérias como da PP1c parcialmente purificada de extratos de N.crassa. Além disso, verificaremos se há alteração da atividade do INc-1 recombinante após sua fosforilação com GSK3 ou PKA. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

BETON, Daniela. Caracterização molecular de INc-1, um inibidor da proteína fosfatase do tipo 1 de neurospora crassa. 2004. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Conjunto das Químicas (IQ e FCF) (CQ/DBDCQ) São Paulo.