Caracterização do gene de Paracoccidioides brasiliensis homólogo a MDJ1, que codifica uma DNAj mitocondrial

• Processo: 01/02288-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2001
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2003
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Rosana Puccia
• Beneficiário: Wagner Luiz Batista
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Paracoccidioides brasiliensis Paracoccidioidomicose Diferenciação celular Proteases dependentes de ATP
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Gene Mdj1 | Hsp40 Mitocondrial | Paracoccidioides Brasiliensis | Pblon

Resumo

Paracoccidioides brasiliensis é o fungo dimórfico responsável pela paracoccidioidomicose (PCM). A diferenciação celular do fungo de micélio para levedura nos pulmões é essencial para a ocorrência da PCM e é dependente de temperatura. A expressão de proteínas de estresse (Hsp), pouco conhecidas no P. brasiliensis, deve ser importante nesse processo. No laboratório foi recentemente caracterizado um gene desse patógeno homólogo ao da proteinase Lon ATP-dependente (PbLON), o qual é super-expressado durante o choque térmico em bactérias e leveduras. In vivo, a atividade de Lon depende da presença de proteínas de estresse do sistema DnaK (Hsp70)/DnaJ (Hsp40), que tem a função de manter a solubilidade de proteínas alvo desnaturadas, facilitando o ataque hidrolítico. Adicionalmente, os substratos a serem digeridos pela Lon parecem ser selecionados na bactéria pela DnaJ. Em P. brasilensis, a região 5' do gene homólogo ao MDJ1 de levedura foi encontrada (PbMDJ1) adjacente ao PbLON, em direção oposta, e provavelmente compartilhando elementos de promotor. Essa organização cromossomal é interessante, já que Mdj1p é o membro da família DnaJ localizado na matriz mitocondrial. Este projeto visa cumprir as etapas iniciais de um projeto mais amplo de estudo da funcionalidade de Pb-Mdj1p e da Pb-Lon e tem por objetivos a caracterização do gene completo do PbMDJ1, obtenção de proteína recombinante e verificação da expressão gênica em situações de estresse. (AU)