Purificação e caracterização bioquímica e biológica da proteína p83 de sistema nervoso central do rato

• Processo: 01/13511-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2002
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Antonio Roberto Martins
• Beneficiário: Ludmyla Kandratavicius
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cerebelo | Proteina P83

Resumo

KM+ é uma lectina ligante de D(+)-manose purificada de semente de Artocarpus integrifolia (jaqueira). Estudos realizados em nosso laboratório usando anticorpo anti-KM+ em secções de cerebelo de rato mostraram imunorreatividade KM+ símile específica. A proteína responsável por esta imunorreatividade foi parcialmente purificada e caracterizada a partir de homogeneizado de cerebelo de rato, e a denominamos p83 por apresentar Mr ~ 83 kDa. Sua expressão é desenvolvimento - dependente, não é, como KM+, da família das jacalinas e parece ser específica do sistema nervoso central. A purificação de p83 é um procedimento complexo, devido à sua tendência de se associar as outras macromoléculas em condições nativas. Foi detectada associada à laminina, tau, e tubulina, proteínas que estão envolvidas em fenômenos de reconhecimento e migração celular durante o desenvolvimento neural, e também à heat-shock protein 90B, contaminante que impediu seu seqüenciamento. Apesar disto, foi possível identificar seqüências peptídicas não descritas, o que indica que p83 é uma proteína nova. As abordagens para caracterizar bioquímica e biologicamente p83 propostas neste projeto são: 1) purificar p83 até obter preparação homogênea ou no mínimo seqüênciável; 2) caracterizar bioquimicamente p83; 3) produzir anticorpos anti-p83; 4) estudar a expressão regional de p83 no SNC do rato; e 5) estudar a expressão de p83 durante a corticogênese cerebelar do rato. (AU)