Caracterização da RNA polimerase de Trypanosoma cruzi

• Processo: 01/00021-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2001
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2003
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Sergio Schenkman
• Beneficiário: Fernando de Macedo Dossin
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 98/15979-0 - Organização nuclear e controle da expressão gênica, AP.TEM
• Assunto(s): Transcrição genética RNA polimerase II RNA mensageiro Trypanosoma cruzi
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Rna Polimerase Ii | Transcricao | Tryponosoma Cruzi

Resumo

Procuraremos entender melhor a natureza da enzima envolvida na transcrição dos genes codantes para mRNA em T. cruzi e saber se ela contem ou não o CTD (domínio carboxi-terminal). Estudaremos a natureza bioquímica desta enzima, pretendendo mais especificamente: 1) Identificar, purificar e caracterizar atividades de transcrição a partir de extratos nucleares de T. cruzi, focalizando nas frações com maior sensibilidade a amanitina (pol II e pol III). 2) Detectar nos diferentes tipos de enzima a presença do CTD utilizando anticorpos gerados a partir de recombinantes para esta região. 3) Realizar ensaios de transcrição in vitro utilizando os promotores SL (splice leader), ou seqüências divergentes encontradas em cromossomos de tripanosomas com extratos nucleares e as enzimas purificadas, ou parcialmente purificadas. (AU)