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Caracterização do promotor da PSACE (Variante-4): um novo membro do cluster gênico da enzima conversora da angiotensina 1

Processo: 04/15709-6
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
Data de Início da vigência: 01 de abril de 2005
Data de Término da vigência: 09 de março de 2007
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
Pesquisador responsável:José Eduardo Krieger
Beneficiário:Maria Fernanda Pimentel de Carvalho
Instituição Sede: Instituto do Coração Professor Euryclides de Jesus Zerbini (INCOR). Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP (HCFMUSP). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Peptidil dipeptidase A   Isoformas de proteínas   Sistema renina-angiotensina
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Isoformas Da Eca | Promotor | Variantes Da Eca

Resumo

O Sistema Renina-Angiotensina (SRA) é um potente mecanismo de manutenção da homeostase da pressão arterial, do qual a AngiotensinaII (AngII) é a substância ativa. Assim sendo, a Enzima Conversora da Angiotensinal (ECA), responsável pela produção de Ang II, é conhecida como um importante mediador de eventos cardiovasculares. Estudos recentes desenvolvidos em nosso laboratório apontaram para a existência de duas novas isoformas da ECA, evidenciadas por ESTs em rato e por SAGE em humano. As novas isoformas, nomeadas de Variantes-3 e -4, estão localizadas no mesmo locus que a ECA, sugerindo a presença de um cluster gênico. Vários estudos com as novas isoformas já vêm sendo realizados comprovando sua existência, como a clonagem dos cDNA's e a expressão protéica. Através de análises comparativas com o gene da ECA, verificamos a presença de elementos conservados na região do promotor da Variante-4 também presentes no promotor da ECA. O objetivo do presente trabalho é a investigação da região 5' imediatamente a montante do início da transcrição da Var-4 do gene da ECA quanto à presença de elementos regulatórios que controlem a expressão gênica. Nos ensaios in vitro, utilizaremos técnicas de avaliação da atividade promotora através da clonagem da região promotora em pGL2 e transfecção em culturas de células para a determinação das seqüências regulatórias do promotor da Var-4. Nos ensaios in vivo, desenvolveremos um camundongo transgênico da região promotora para os ensaios funcionais. (AU)

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