Heritability in generalized aggressive periodontitis: microbiological, immunological and preventive aspects = Hereditariedade na periodontite agressiva generalizada: aspectos microbiológicos, imunológicos e preventivos

Autor(es)

Mabelle de Freitas Monteiro

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Piracicaba, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Odontologia de Piracicaba
• Data de defesa: 2019-02-26

Membros da banca

Renato Corrêa Viana Casarin; Marcia Pinto Alves Mayer; Purnima Kumar; Mauro Pedrine Santamaria; Enílson Antonio Sallum

• Orientador: Renato Corrêa Viana Casarin

Resumo

Periodontite agressiva generalizada (PAG) é uma doença multifatorial causado por um desequilíbrio entre a resposta do hospedeiro e as agressões do biofilme. Ela é caracterizada pela agregação familiar dos casos, provavelmente associada ao compartilhamento de fatores de susceptibilidade entre membros de uma mesma família, o que poderia aumentar o risco de descendentes de indivíduos PAG também desenvolverem a doença. Neste contexto, o presente trabalho descreve dois estudos diferentes, um com o objetivo de caracterizar o microbioma, assim como a sua associação com a resposta do hospedeiro, em indivíduos PAG e seus filhos e o segundo estudo objetivando avaliar a pasta de dente contendo Triclosan como uma terapia adjunta no controle das alterações precoces demonstradas em descendentes PAG. No primeiro estudo 15 pais PAG com pelo menos um filho com idade entre 6 e 12 anos e 15 pais periodontalmente saudáveis com pelo menos uma criança entre 6 e 12 anos foram selecionadas. O exame clínico e a coleta de biofilme subgengival e fluido gengival (GCF) foram realizados para todos os participantes. O DNA bacteriano do biofilme subgengival foi extraído, a região 16S do rRNA foi sequenciado utilizando a plataforma Illumina MiSeq e ferramentas de bioinformática foram utilizadas para analisar os dados. O fluido crevicular gengival foi analisado com a tecnologia Luminex MAGPIX para a identificação das citocinas interferon (IFN) -?, fator de necrose tumoral (TNF-?) e interleucinas (IL) -10, IL-17, IL-1?, IL-4, IL-6, IL-8. Crianças de pais PAG apresentaram piores condições clínicas, bem como um microbioma mais patogênico do que crianças de pais saudáveis. Uma forte correlação foi observada entre o microbioma do pai e o microbioma de seu filho. Diferenças nos níveis de citocinas foram observadas apenas em pais PAG que apresentaram níveis menores de IFN-?, IL-10 e IL-17. Apesar de não haver diferenças nos níveis de citocinas, as crianças dos pais PAG apresentaram alteração nas interações entre bactérias e o hospedeiro e demonstraram um padrão similar ao apresentado por seus pais. No segundo estudo, 18 crianças (entre 6 e 12 anos) filhas de indivíduos PAG e 18 criança filhas de ambos os pais periodontalmente saudáveis foram incluídas em um programa de controle de placa por 3 meses. Todos os indivíduos foram periodontalmente avaliados e submetidos a coleta de biofilme subgengival e GCF no início do estudo e após 3 meses de controle de placa. Sequenciamento de nova geração e ferramentas de bioinformática foram utilizadas para a avaliação do biofilme subgengival enquanto a plataforma Luminex/MAGPIX foi usada para aas análises inflamatórias no GCF. Análise de discriminantes lineares do índice Morisita-Horn demonstrou dois aglomerados maciços separando filhos de pais PAG de filhos de pais saudáveis (teste Adonis, p=0.014), demonstrando um impacto significativo da doença periodontal parental no microbioma de dos seus descendentes. Um microbioma mais patogênico associado com maior interrelação bactéria-hospedeiro e piores condições clínicas foram identificadas em crianças PAG. O microbioma disbiótico de descendentes PAG mostrou uma forte resiliência a mudança depois do controle de placa, mantendo a diversidade e a riqueza de espécies associadas a doença periodontal mesmo depois que benefícios clínicos forma atingidos. Além disso, o controle de placa não foi suficiente para alterar o padrão de interações entre o microbioma e o hospedeiro. No terceiro estudo, 15 crianças de pais PAG e 15 crianças de pais periodontalmente saudáveis foram incluídas neste estudo placebo cruzado. As crianças foram alocadas aleatoriamente nos grupos Triclosan ou Placebo para participar da primeira fase do estudo. Inicialmente, todas as crianças participaram de um período de wash-out de 15 dias usando apenas o creme dental placebo para posteriormente começaram a usar o creme dental selecionado por 45 dias. Após a primeira fase, eles repetiram o período de 15 dias de wash-out usando apenas o creme dental placebo. Os grupos foram cruzados e as crianças usaram a outra pasta por mais 45 dias. Em cada fase, foram realizados exame clínico e coleta de saliva, GCF e biofilme subgengival no exame inicial e aos 45 dias de estudo. Os níveis de IFN-?, IL-17, IL-4, IL-1?, IL-10 e TNF-? foram analisados pela plataforma Luminex / MAGpix e os níveis de patógenos periodontais salivares e subgengivais por qPCR. No início do estudo, as crianças dos pais PAG apresentaram maiores índice de placa (IP), índice gengival (IG) e sangramento à sondagem (SS), além de maiores concentrações de Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa) na saliva e no biofilme subgengival e menores níveis de INF-?, IL-4, IL-17 no GCF. A terapia com placebo apenas reduziu o IP, em ambos os grupos. O creme dental com Triclosan reduziu o IP, assim como o IG, em ambos os grupos. Além disso, o Triclosan promoveu redução adicional do SS, da profundidade de sondagem (PS), dos níveis salivares Aa e IL-1? no grupo PAG. No grupo de saúde, Triclosan promoveu uma redução de INF-? e IL-4. Em conclusão, o microbioma e as interações hospedeiro-biofilme foram alterados nos indivíduos PAG e seus descendentes e uma forte correlação entre o estado periodontal dos pais e de seus filhos foi demonstrada. A disbiose foi relaciona com correlações mais intensas entre as bactérias e o hospedeiro e maior inflamação clínica. O controle de placa não foi suficiente para mudar o ambiente subgengival mais patogênico em descendentes PAG, que demonstrou uma alta resiliência para as mudanças microbiológicas e destacou o maior risco para o desenvolvimento de doença periodontal. Além disso, o creme dental com Triclosan demonstrou-se mais eficiente do que o creme dental placebo em controlar o perfil mais patogênico observado em PAG, uma vez que reduziu os níveis de sangramento a sondagem, sondagem periodontal, Aa salivar e IL-1?, em crianças de pais PAG (AU)

• Processo FAPESP: 16/03704-7 - Avaliação metagenômica e imunoinflamatória de indivíduos com periodontite agressiva generalizada e seus filhos
• Beneficiário: Mabelle de Freitas Monteiro
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado