Relação das subpopulações espermáticas em touros Senepol com a produção in vitro de embriões

Autor(es)

Suzane Peres Campanholi

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Jaboticabal. 2020-06-08.
• Instituição: Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias. Jaboticabal
• Data de defesa: 2019-11-08
• Orientador: Lindsay Unno Gimenes; Fabio Morato Monteiro

Resumo

Em bovinos, a produção in vitro de embriões (PIVE) configura-se como uma das biotecnologias reprodutivas de maior importância no Brasil, sendo responsável pela rápida expansão da raça Senepol em nosso país. Estimar a PIVE em animais Senepol com base na análise seminal dos reprodutores seria valioso para a indústria de criopreservação de sêmen, institutos de pesquisa e criadores da raça. Espermatozoides que diferem quanto ao seu padrão de motilidade coexistem em um ejaculado e podem ser agrupados em diferentes subpopulações espermáticas após análise da cinética com o sistema CASA (Computer-assisted sperm analysis). Aliar essa avaliação com outras análises de qualidade espermática e analisar os resultados com estatísticas multivariadas e inteligência artificial pode ajudar a melhorar a estimativa de fertilidade de um reprodutor. Diante disso, os objetivos no presente estudo foram: 1) identificar e caracterizar as subpopulações espermáticas no sêmen criopreservado de touros Senepol após processo de lavagem para fertilização in vitro (FIV); 2) gerar um modelo estatístico para estimar a PIVE com base nas subpopulações espermáticas e demais atributos espermáticos analisados, utilizando análises estatísticas multivariadas e 3) aplicar a inteligência artificial, por meio do uso das redes neurais artificiais (RNAs) com o intuito de melhorar a estimativa da PIVE. Dados retrospectivos de 386 rotinas de PIVE foram obtidos a partir dos registros pertencentes à empresa In Vitro Brasil e a produção embrionária foi categorizada em alta, média e baixa. Após, 38 amostras de sêmen criopreservado de touros Senepol, utilizadas nas rotinas de PIVE, foram adquiridas da empresa Senepol 3G para avaliação. Pós-descongelação todas as amostras passaram por avaliação da morfologia espermática e em seguida foram submetidas a um processo de lavagem que é realizado antes da FIV. Pós-lavagem todas as amostras foram avaliadas pelo sistema CASA para obter a cinética geral das amostras e a cinética individual dos espermatozoides. Ademais, foi realizada avaliação, por citometria de fluxo, da integridade das membranas plasmática e acrossomal, potencial mitocondrial, status oxidativo e resistência da cromatina. Após análises multivariadas de componentes principais e agrupamento foram identificadas três subpopulações espermáticas: SBP1 (movimento rápido e progressivo), SBP2 (movimento hiperativado) e SBP3 (movimento lento e não progressivo). Com a análise de regressão logística foi constatado que a PIVE sofre efeito da SBP1 e SBP2 e um modelo com essas variáveis foi gerado para estimar as categorias de produção embrionária. Com a análise de RNAs foram gerados modelos para estimar a PIVE com 18, oito e seis variáveis preditoras, sendo que o modelo mais simples incluiu as três subpopulações espermáticas e as variáveis de integridade das membranas plasmática e acrossomal, alto potencial mitocondrial e defeitos totais como preditores. (AU)

• Processo FAPESP: 16/24107-7 - Relação das subpopulações espermáticas em touros Senepol com a produção in vitro de embriões
• Beneficiário: Suzane Peres Campanholi
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado