Possiveis novos mecanismos de patogenicidade de amostras de Escherichia coli isoladas de suinos com diarreia e pesquisa de adesinas usando metodos in vitro e in vivo

Autor(es)

Adriana de Sousa

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
• Data de defesa: 1997-10-24

Membros da banca

Antonio Fernando Pestana de Castro; Lucila Costallat Ricci; Josias Rodrigues

• Orientador: Antonio Fernando Pestana de Castro

Resumo

Foram estudadas 190 amostras não-toxigênicas (L T-I, L T-II, STa, STb, SL T-I, SL T-II, CNF1, CNF2) de Escherichia colí isoladas de diarréia em suínos. Pelo teste de aderência em células HeLa, 47 amostras foram identificadas com diferentes perfis de adesão, a saber: agregativa (EaggEC) 18/47 (38,3%),"cover slip"(CS) 7/47 (14,9%); difusa (DA) 2/47 (4,2%) e não característica (NC) 20/47 (42,5%). Não foram encontradas amostras com adesão localizada (AL). Ao contrário do que ocorre em amostras de origem humana, quando o mesmo teste foi realizado em células HEp-2, houve correspondência de apenas 17% dos resultados, principalmente entre as amostras com perfil NC. O teste de Microhemaglutinação Manose-Resistente (MHMR) não revelou títulos significantes com nenhuma das hemácias testadas ( ovina, bovina, equina, humana, de cobaio e galinha ). A sorologia para detecção de fatores de colonização já descritos identificou a presença das adesinas K99, K88, F41, F42, F165, 987P, F107, 8199 e 2134P entre as amostras estudadas, as quais não estão entre as que apresentaram resultados relevantes em testes posteriores. O teste de FAS para avaliar a polimerização da actina, foi positivo (++) com apenas 07 (14,8%), das amostras aderentes em HeLa, a saber: 817, E3, 2a2, 2d2, 2374c, 2386a, 2387 a, o que poderia indicar presença do gene eaeA. Testes realizados com sonda específica e PC R, contudo, foram negativos, o que foi confirmado pelo teste de Western blot usando-se soro anti-intimina específico. O exame de cultivos de HEp-2 infectados com algumas amostras FAS+, ( E3, 2d2 e 2374c ) e FAS - ( C9), por microscopia eletrônica, revelou lesões "attaching and effacing"{AlE), típicas de amostras eaeA+. Duas destas amostras ( E3 e 2d2 ) testadas em alça-ligada de leitões recém-nascidos, não produziram lesões semelhantes, ou pelo menos, com a mesma intensidade que a amostra E2348/69, padrão EPEC. A descrição da presença do gene eaeA em amostras do sorogrupo 045"K65" isoladas de diarréia em suínos encaminhou-nos na realização de sorotipagem das nossas amostras, sendo encontradas 4 amostras pertencentes a este sorogrupo, as quais não apresentaram resultados relevantes nos demais testes realizados. Conclusivamente, os resultados obtidos permitem supor a existência nos colibacilos não toxigênicos isolados de suíno com diarréia estudados, de alguma estrutura, eventualmente também responsável pelos padrões de adesão encontrados, que à semelhança da intimina de EPEC e/ou EHEC, causariam o fenômeno de AlE na célula hospedeira (AU)

• Processo FAPESP: 95/01628-3 - Possiveis novos mecanismos de patogenicidade de amostras de escherichia coli isoladas de suinos com diarreia e pesquisa de adesinas, usando metodos in vitro e in vivo.
• Beneficiário: Adriana de Sousa Penteado
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado