Influencia da sacarose na diversidade genotipica de S. mutans no biofilme dental detectados por AP-PCR: estudo in situ e in vivo

Autor(es)

Rodrigo Alex Arthur

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Piracicaba, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Odontologia de Piracicaba
• Data de defesa: 2006-02-22

Membros da banca

Cinthia Pereira Machado Tabchoury; Marcia Pinto Alves Mayer; Pedro Luiz Rosalen

• Orientador: Renata de Oliveira Mattos Graner; Cinthia Pereira Machado Tabchoury

Resumo

É bem conhecido que a sacarose promove modificações na microbiota do biofilme dental, levando à seleção de microrganismos acidúricos e acidogênicos. No entanto, pouco se sabe sobre sua influência na diversidade genotípica de Streptococcus mutans. Assim, o objetivo do presente estudo cruzado foi avaliar a diversidade genotípica de S. mutans no biofilme dental formado in vivo e in situ na presença de sacarose ou glicose+frutose. Sete dias antes do início do experimento e durante todas as etapas experimentais os voluntários utilizaram dentifrício não-fluoretado. No início do experimento, foi coletada saliva estimulada dos voluntários para determinação dos níveis de estreptococos do grupo mutans, microrganismos totais, estreptococos totais e identificação dos genótipos de S. mutans. Durante a etapa in vivo, 7 voluntários adultos saudáveis bochecharam, 8 x/dia, água destilada e deionizada, soluções de glicose 10% + frutose 10% ou de sacarose 20%, por 3 dias consecutivos, durante os quais não houve higienização dental na região de pré-molares e molares superiores, para possibilitar acúmulo de biofilme. Ao final do período, o biofilme formado nesses dentes foi coletado. Durante a etapa in situ, dividida em 3 fases de 3 dias cada, os mesmos voluntários utilizaram dispositivos intra-orais palatinos contendo 2 blocos de esmalte dental humano hígido, sobre os quais foram gotejadas, 8 x/dia, as mesmas soluções descritas acima e o biofilme foi coletado após 3 dias de formação. Todos os voluntários passaram por todos os tratamentos. Colônias com morfologia típica de S. mutans foram isoladas da saliva e do biofilme dental e o DNA desses isolados foi extraído. PCR com primers espécie-específicos confirmaram a identidade molecular desses isolados, que foram submetidos à genotipagem com o primer OPA-02 pela técnica de AP-PCR. Somente 1 genótipo esteve presente na saliva de 85,7% dos voluntários, mas nos biofilmes in vivo e in situ, além do genótipo salivar, outros foram encontrados. Diversidade genotípica similar foi encontrada quando o biofilme in vivo foi comparado ao biofilme in situ. Não houve diferença quantitativa na diversidade genotípica de S. mutans entre os tratamentos, mas glicose+frutose e sacarose apresentaram genótipos diferentes daqueles encontrados no biofilme de água destilada (AU)

• Processo FAPESP: 03/10972-8 - Influencia da sacarose na diversidade genotipica de estreptococos do grupo mutans detectados por ap-pcr - estudo in situ e in vivo.
• Beneficiário: Rodrigo Alex Arthur
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado