Desenvolvimento de uma metodologia de transformação de leveduras endofíticas de citros

Resumo

Uma análise prévia da população de leveduras endofíticas de citros (Citrus sinensis) mostrou que Candida zeylanoides e Candida vini são as espécies mais freqüentes, tanto em plantas sadias quanto naquelas afetadas pela CVC. Outros estudos de inoculação e de Microscopia Eletrônica de Varredura mostraram que estas leveduras podem colonizar vários tecidos da planta, inclusive o xilema. A CVC (Clorose Variegada dos Citros) é uma doença causada pela bactéria Xyllela fastidiosa que habita o xilema onde obstrui o fluxo de seiva e causa uma grande queda da produção. Neste projeto temos como objetivo desenvolver uma metodologia de transformação destas leveduras para possibilitar a introdução de genes de interesse e que sejam expressos nos tecidos de plantas cítricas. Testaremos inicialmente metodologias de transformação utilizando uma série de plasmídios já disponíveis e capazes de expressar em levedura uma variante da GFP (Green Fluorescent Protein). Aquelas leveduras transformadas com plasmídios estáveis serão então inoculadas em plantas para os estudos de microscopia da localização nos tecidos vegetais e da expressão do gene da GFP in planta. Um estudo paralelo será executado para avaliarmos os efeitos destas leveduras na promoção de crescimento de plântulas cítricas. (AU)