Estudo de moléculas isotopicamente enriquecidas em carbono 13 e nitrogênio 15 via ressonância magnética nuclear de 1,2 e 3 dimensões

Resumo

Os avanços no campo da espectroscopia de ressonância magnética nuclear aliada à utilização de precursores enriquecidos em isótopos estáveis tomaram possível a investigação, via RMN, de rotas biossintéticas envolvendo moléculas de grande complexidade estrutural disponíveis em quantidades extremamente limitadas. Além disso, a RMN consiste em uma ferramenta poderosa oferecendo informações sobre a dinâmica de biomoléculas. Neste contexto, a introdução de técnicas multidimensionais foi particularmente importante para estudos conformacionais de oligonucleotídeos e proteínas em solução. Neste trabalho, utilizaremos a RMN com dois objetivos principais: 1) A investigação da rota biossíntetica de um metabólito secundário inédito, isolado pelo nosso grupo, a partir de culturas de Aspergillus terreus. A incorporação de precursores marcados com carbono 13 viabilizará, dentre outros, a aplicação da seqüência de pulso de INADEQUATE 2D. 2) Estudos conformacionais, em solução, de polipeptídeos envolvidos em processos de reprodução sexuada de leveduras. Para tanto, utilizaremos técnicas de 1, 2 e 3D (1H; 13C; 15N; T1; COSY; ROESY; TOCSY-HSQC; ROESY- HSQC) em polipeptídeos isotopicamente marcados (carbono 13 e nitrogênio 15) e não marcados. (AU)