Crio-preservação da ultraestrutura celular mantendo a qualidade antigênica: imunolocalização de proteínas desnaturáveis pela fixação química

Resumo

Na era pós-genômica, estudos das funções e interações dos genes e os seus produtos dependem em forma cada vez maior de avanços técnicos em todos os aspectos da microscopia. O microscópio eletrônico é ainda o instrumento para a visualização de aspectos subcelulares e macromoleculares mediante imunoeletromicroscopia. A fixação para imunoeletromicroscopia possui dois objetivos principais, (a) preservar a ultraestrutura e (b) manter os antígenos nos sítios originais no tecido. Uma boa preservação de ambos aspectos evita interpretação de artefatos. O presente projeto propõe o estudo e padronização de métodos de preservação por congelamento rápido para a localização ultraestrutural de diferentes proteínas solúveis, de membrana, e de adesão que não podem ser localizadas mediante fixação química para ME. As proteínas a serem estudadas fazem parte de projetos com financiamento FAPESP na FMRP. (AU)