Exossomos derivados de celulas dendriticas como adjuvantes naturais na resposta antitumoral.

Resumo

Devido aos vários mecanismos de escape apresentados por neoplasias malignas frente ao sistema imune, o desenvolvimento de estratégias de vacinação antitumoral que consigam contornar estes mecanismos se tornou um alvo constante de estudo dentro da imunologia dos tumores. Apesar de vacinas baseadas em células dendríticas (DCs) se mostrarem promissoras, nenhuma conseguiu, ainda, resultados "definitivos". Assim, abordagens diferentes merecem ser investigadas. A proposta deste trabalho visa tornar células tumorais diretamente imunogênicas, pela incorporação de exossomos derivados de DCs às mesmas. Exossomos (Exo) são pequenas vesículas de origem endocítica que são secretadas por diversas células, inclusive do sistema imune. Exo derivados de células tumorais são capazes de transferir antígenos tumorais as células do sistema imune, de maneira a induzir respostas linfocitárias in vitro contra o tumor. Da mesma forma, Exo derivados de DCs, pulsadas com antígenos tumorais, têm capacidade de transferir, além dos antígenos, moléculas funcionais do Complexo Principal de Histocompatibilidade de classe I e II e moléculas co-estimuladoras a outras DCs, de modo a induzir, eficientemente a ativação de linfócitos T in vitro e in vivo. Em vista deste fenômeno, o presente projeto pretende avaliar o efeito imunológico da incorporação de exossomos, originados de DCs diferenciadas e ativadas em cultura, por células tumorais (da linhagem de adenocarcinomas de mama, SK-BR3). Para isso, serão caracterizados fenotipicamente os exossomos derivados de DCs (presença de CD1a, CD9, CD11c, CD14, CD40, CD54, CD80, CD81, CD83, CD86, HLA-ABC, HLA-DR) e sua incorporação às células tumorais (por citometria de fluxo para os mesmos marcadores). Além disto, pretende-se avaliar a capacidade imunoestimuladora de células tumorais tratadas com Exo sobre linfócitos T (CD4 e CD8) autólogos e atogenêicos (em relação às DCs), por sua capacidade de indução de proliferação, secreção de citosinas e geração de atividade citotóxica. (AU)