Propriedades e funcoes da miosina v no nucleo e no centrossomo.

Resumo

Dados recentes do nosso laboratório têm demonstrado a presença da miosina V no núcleo em vários tipos celulares em cultura e em neurônios em fatias de medula cerebral. Também, demonstramos que a miosina V em sua forma fosforilada está presente transitoriamente nos pólos mitóticos durante metáfase em melanócitos e células HeLa. Estes resultados surpreendentes têm ampliado muito o conceito já estabelecido da miosina V como motor molecular multifuncional em células eucarióticas. As funções e os mecanismos envolvidos na associação da miosina V com o núcleo e fuso mitótico são desconhecidos. Neste projeto aplicáramos metodologia de imunocitoquímica, imunoprecipitação, fracionamento subcelular, cultura de células, western blotting, subclonagem e mutagênese direcionado, transfecção transiente de proteínas recombinantes conjugadas com EGFP, análise de células vivas, ou fixadas, por microscopia confocal e outros métodos para determinar as propriedades da miosina V em células em cultura, em tecidos e em extratos de núcleo e outras frações subcelulares. Afinal, o presente projeto pretende contribuir para definir o papel da miosina V na expressão gênica e no ciclo celular. (AU)