Acetilcolinesterase imobilizada em capilares de sílica fundida: novo formato para triagem de inibidores seletivos

Resumo

O interesse pelo desenvolvimento de técnicas rápidas e eficazes na descoberta de substâncias potenciais que possam ser utilizadas no tratamento de diversas doenças tem aumentado sobremaneira nos últimos anos. Esse interesse vem aliado ao desenvolvimento de tecnologias de "high trhoughput screening" (HTS) (ensaios de alta eficiência), associados à química combinatória, à biotecnologia, aos estudos genômicos e ao desenvolvimento de novos ensaios. A modernização dos ensaios permitiu a utilização de enzimas, receptores, DNA entre outros alvos para a avaliação rápida de grande quantidade de amostras. A identificação de novos candidatos a fármacos que se liguem especificamente a alvos biológicos é uma etapa crucial no processo de triagem de novos fármacos. Um método rápido e eficiente para realizar essa triagem consiste em passar as substâncias de interesse através de uma superfície na qual uma biomolécula (proteína, receptor ou enzima) esteja imobilizada. De modo geral, as substâncias que possuem maior afinidade pela biomolécula permanecem mais tempo retidas, eluindo mais tardiamente, sendo, portanto, os melhores inibidores. A imobilização da enzima tem mostrado diversas vantagens nos estudos enzimáticos on line sobre ensaios enzimáticos em solução principalmente pelo aumento de tempo de vida e estabilidade da enzima, e sua reutilização, além da necessidade de pequenos volumes de amostra. Nesse projeto, biorreatores enzimáticos serão preparados utilizando as enzimas acetilcolinesterase e butirilcolinesterase para serem utilizados nos estudos de triagem e na identificação de inibidores seletivos além de estudos sobre o mecanismo de ação dos inibidores.