Efeito do laser de baixa intensidade sobre células odontoblastoides in vitro e complexo dentino-pulpar in vivo

Resumo

O laser de baixa intensidade, também conhecido como laser terapêutico, tem sido recomendado para uma variedade de procedimentos clínicos, dentre eles o tratamento da hipersensibilidade dentinária. Pesquisas in vivo, onde dentes foram tratados com laser, demonstraram aumento na síntese de matriz de dentina e menor intensidade na reação inflamatória pulpar. Entretanto, o mecanismo que rege este processo permanece desconhecido. Assim, o objetivo desta pesquisa será investigar, in vitro e in vivo, a ação do laser de baixa intensidade sobre o metabolismo de células odontoblásticas em cultura e seus efeitos sobre o complexo dentino-pulpar. Para o experimento in vitro será utilizada a linhagem de células odontoblastóide MDPC-23 que serão cultivadas em placas de acrílico ou sobre a superfície pulpar de discos de dentina obtidos de dentes humanos, os quais serão montados em uma câmara pulpar artificial especialmente desenvolvida para este estudo. O laser, com parâmetros específicos pré-determinados, será aplicado diretamente sobre as células (ação direta) ou sobre a superfície oclusal dos discos de dentina (ação transdentinária). Para avaliação do metabolismo celular, proteína total e fosfatasse alcalina das células serão realizados os ensaios de MTT, Read, Northcote e Kit de Fosfatasse Alcalina - Ensaio de Ponto Final, respectivamente. As células tratadas indiretamente (interposição do disco de dentina) serão submetidas às mesmas avaliações, além do ensaio de RT-PCR para avaliação da expressão dos genes que codificam para colágeno tipo I (Col-1) e fibronectina (FN). Para a avaliação in vivo, cavidades de classe I serão confeccionadas nos primeiros molares de ratos, as quais serão irradiadas com o melhor parâmetro de laser determinado pelo protocolo transdentinário. Após 7, 15 e 30 dias, os animais serão sacrificados e os dentes processados para avaliação histológica da resposta do complexo dentino-pulpar à terapia fotodinâmica proposta. (AU)