Caracterização de redes de regulação de microRNAs associados ao carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço por microarrays e estudos funcionais em cultura de células

Resumo

MicroRNAs (miRNAs) são pequenas moléculas de RNA não codificantes que atuam como silenciadores pós-transcricionais, exercendo funções essenciais nos processos de iniciação e progressão tumoral. Nesse trabalho pretendemos determinar o possível papel de dois miRNAs no carcinoma epidermóide de boca por meio de estudos funcionais. A seleção dos miRNAs teve como base os resultados da avaliação de padrões de expressão global dessas moléculas, obtidos por experimentos com microarrays específicos realizados por nosso grupo, em tumores epidermóides orais comparados com suas respectivas margens cirúrgicas livres de tumor. A primeira abordagem consiste na transfecção de queratinócitos orais humanos provenientes de culturas primárias com inibidores de miRNA. Esses experimentos nos permitirão estudar o impacto da inibição da atividade dos miRNAs no sistema celular escolhido. Utilizaremos também uma abordagem complementar onde estudaremos o impacto da super-expressão desses miRNAs nos queratinócitos por meio da introdução de precursores de miRNAs capazes de mimetizar miRNAs maduros. O efeito global dessas intervenções será avaliado por microarrays. A combinação dessas metodologias nos permitirá determinar alvos e inferir possíveis mecanismos relacionados com o seu papel no carcinoma epidermóide de boca. Pretendemos assim contribuir para a compreensão das alterações moleculares relacionadas como esse tipo de tumor, gerando subsídios para a identificação de alvos terapêuticos ou marcadores de prognóstico. (AU)