Avaliação do efeito imunoestimulatório de Lactobacillus spp. expressando ctxB e ltb em aves desafiadas com Salmonella enteritidis

Resumo

O gênero Lactobacillus é um dos principais colonizadores do trato gastrintestinal das aves e desempenha funções imunológicas relevantes, tais como estimular a secreção de imunoglobulina da classe A (IgA) intestinal. Recentemente, tem-se intensificado a sua aplicação, como veículo de vacina oral, em função das características de: sobrevivência às enzimas gástricas, colonização e aderência ao epitélio intestinal das aves e imunoestimulação. Existe informações na literatura que determinados genes, tais como ctxB e ltb da subunidade B da toxina colérica e enterotoxina termolábil de Escherichia coli, respectivamente, atuam como imunoestimulantes de mucosa. Por esses motivos, os objetivos do presente projeto são clonar e expressar os genes ctxB e ltb, em amostras de Lactobacillus spp. visando verificar a ocorrência de aumento na capacidade irnunoestimulatória das amostras recombinantes. Com esse propósito, amostras bacterianas do gênero Lactobacillus spp. serão identificadas através de reação em cadeia da polimerase (PCR) e sequenciamento. Em seguida, serão testadas quanto à capacidade de adesão ao trato entérico das aves. As amostras que apresentarem melhores resultados quanto a adesão serão selecionadas e transformadas com os plasmídeos recombinantes, contendo os gene ctxB e ltb clonados nos vetores pIA5lacGFP e pIA5lacl 133PVA. Após a confirmação da transformação e expressão, as amostras de Lactobacillus recombinantes serão avaliadas em testes in vivo, com quantificação de IgA e IgG por testes de ELISA. E finalmente, os grupos tratados com Lactobacillus recombinante serão desafiados com Salmonella Enteritis. Ao término da investigação espera-se ter clonado e expresso os genes ctxB e ltb em Lactobacillus spp., obter informações sólidas sobre a capacidade irnunoestimulatória dessas amostras recombinantes, bem como do papel de IgA secretória sobre o controle de infecções por Salmonella Enteritidis. (AU)