O efeito do fator de crescimento semelhante à insulina-I em oócitos coletados de vacas Bos indicus e Bos taurus expostas ao estresse térmico in vivo

Resumo

A aquisição da competência oocitária e o desenvolvimento embrionário podem ser interrompidos por alterações no microambiente do trato reprodutivo. Este fenômeno tem sido demonstrado em animais expostos ao estresse térmico. Já foi demonstrado que vacas Bos indicus apresentam adaptações fenotípicas e genotípicas que conferem maior resistência e tolerância à temperatura elevada quando comparadas aos animais Bos taurus. Conseqüentemente, as vacas Bos taurus sofrem uma redução nos índices de prenhez durante os meses quentes do ano. A infertilidade causada pelo estresse térmico é um problema de ordem multi-fatorial, entretanto já foi demonstrado que o oócito e embrião são extremamente susceptíveis aos efeitos deletérios do estresse térmico. Os danos celulares desencadeados pela temperatura elevada podem ser manipulados por amplo espectro de fatores biológicos, incluindo o fator de crescimento semelhante à insulina-I (IGF-I). Além de minimizar a morte celular espontânea, o IGF-I resgata células que já iniciaram apoptose induzida por diferentes agentes ou estresses. Dessa forma o objetivo desta proposta é determinar o papel do IGF-I na competência de oócitos coletados de vacas Bos indicus (Nelore) e Bos taurus (Holandesa) expostas ao estresse térmico in vivo em câmara climática. Para tanto, vacas das raças Holandesa e Nelore previamente sincronizadas serão expostas aos tratamentos estresse térmico ou termoneutralidade durante 21 dias. Durante este período todos os animais serão submetidos à OPU a cada 3-4 dias. Em seguida os animais serão mantidos em piquetes sob condições de termoneutralidade por período adicional de 112 dias e serão submetidos à OPU a cada 14 dias. Os complexos cumulus-oócito aspirados serão maturados in vitro na presença ou ausência do IGF-I. Em seguida serão fecundados e cultivados in vitro. A percentagem de clivagem será determinada no dia 3 após a fecundação e a percentagem de embriões que desenvolveram até os estádios de 8-16 células, mórula e blastocisto será determinada nos dias 4, 5 e 7-8 após a fecundação, respectivamente. A qualidade dos blastocistos será avaliada no dia 8 após a fecundação pela co-localização das alterações mitocondriais e nucleares características de apoptose. (AU)