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Efeito do plasma seminal na inibição/reversão das mudanças semelhantes à capacitação e na fertilidade dos espermatozóides criopreservados de suínos

Processo: 11/23484-8
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Regular
Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2012
Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2014
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
Pesquisador responsável:André Furugen Cesar de Andrade
Beneficiário:André Furugen Cesar de Andrade
Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Pesquisadores associados:Anibal de Sant'Anna Moretti ; Flávio Vieira Meirelles ; Simone Maria Massami Kitamura Martins
Assunto(s):Suínos  Citometria de fluxo  Sêmen animal  Criopreservação  Fertilização 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Análise computadorizada do espermatozóide | Citometria de fluxo | criopreservação do sêmen | Plasma seminal | Reprodução de suínos | teste de fertilidade | Reprodução de Suínos

Resumo

O presente projeto pretende determinar se a técnica de criopreservação gera modificações semelhantes à capacitação e também verificar se a adição/manutenção de plasma seminal ao sêmen suíno antes da congelação ou após a descongelação diminui estes efeitos. Serão realizadas colheitas de sêmen de 12 cachaços. Realizadas as análises iniciais do sêmen (in natura) este será diluído para posterior centrifugação. Após a centrifugação, os sedimentos obtidos serão divididos em dois tratamantos, a saber: Controle (CON) - suspendidos apenas com diluidor para congelação e (PAC) - suspendido com diluidor para congelação acrescido de 10 % de plasma seminal (v/v). O sêmen diluído será envasado em palhetas de 0,5 mL e então submetidos à congelação. Por partida, serão descongeladas dez palhetas do grupo PAC e dez do grupo CON. Nestes dois grupos (CON e PAC) serão então adicionados 45 mL do diluidor Prolimax® a fim de se obter o volume inseminante de 50 mL em uma concentração de 60x106sptz/mL. Desta mesma partida, outras dez palhetas do grupo CON serão descongeladas e diluídas com diluidor Prolimax®, contendo 10 % de plasma seminal (v/v) dando origem ao terceiro tratamento, grupo PDC. Após a adição dos tratamentos as amostras permanecerão em banho-Maria a temperatura de 37°C até o final das análises (120 minutos). Os grupos experimentais serão avaliados nos períodos 0 e 120 minutos. As análises do sêmen consistirão na análise computadorizada dos parâmetros da motilidade (CASA), e das análises por citometria de fluxo da integridade das membranas plasmática e acrossomal, do estado de capacitação, do aumento da fosforilação do aminoácido tirosina e da peroxidação lipídica das membranas. Será também realizado o teste de fertilidade em 75 marrãs comparando os tratamentos CON (n=25), PAC (n=25) e PDC (n=25). Os dados serão submetidos à análise de variância (PROC GLM), empregando-se o programa SAS (1998). As médias serão comparadas pelo teste de Tukey. Já as variáveis taxa de fertilidade e a taxa de parto serão analisadas pelo teste não-paramétrico de freqüência Qui-Quadrado ao nível de 5% de significância. (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
TORRES, M. A.; RAVAGNANI, G. M.; LEAL, D. F.; MARTINS, S. M. M. K.; MURO, B. B. D.; MEIRELLES, F. V.; PAPA, F. O.; DELL'AQUA JUNIOR, J. A.; ALVARENGA, M. A.; MORETTI, A. S.; et al. Seminal plasma arising from the whole boar sperm-rich fraction increases the stability of sperm membrane after thawing. JOURNAL OF ANIMAL SCIENCE, v. 94, n. 5, p. 1906-1912, . (13/08070-8, 11/23484-8)
RAVAGNANI, GISELE M.; TORRES, MARIANA A.; LEAL, DIEGO F.; MARTINS, SIMONE M. M. K.; PAPA, FREDERICO O.; DELL'AQUA JUNIOR, JOSE A.; ALVARENGA, MARCO A.; ANDRADE, ANDRE F. C.. Cryopreservation of boar semen in 0.5mL straws at low spermatozoa concentration is better than high concentration to maintain sperm viability. Pesquisa Veterinária Brasileira, v. 39, n. 9, p. 1726-1730, . (11/23484-8)
TORRES, MARIANA ANDRADE; DIAZ, ROMMY; BOGUEN, RODRIGO; MASSAMI KITAMURA MARTINS, SIMONE MARIA; RAVAGNANI, GISELE MOURO; LEAL, DIEGO FEITOSA; OLIVEIRA, MELISSA DE LIMA; DONATELLI MURO, BRUNO BRACCO; PARRA, BEATRIZ MARTINS; MEIRELLES, FLAVIO VIEIRA; et al. Novel Flow Cytometry Analyses of Boar Sperm Viability: Can the Addition of Whole Sperm-Rich Fraction Seminal Plasma to Frozen-Thawed Boar Sperm Affect It?. PLoS One, v. 11, n. 8, . (13/08070-8, 14/22972-7, 11/23484-8)