Viabilidade e bioatividade celular de materiais à base de Cimento Portland em cultura primária de células do folículo e polpa dental humanos, fibroblastos e osteoblastos

Resumo

Estudos com culturas celulares primárias representam ferramenta importante para estudo de efeitos tóxicos dos materiais e previsão de uso em seres humanos. O objetivo geral deste projeto é isolar células humanas do folículo e da polpa dentária de terceiros molares inclusos submetidos à exodontia, caracterizar estas células e mantê-las criopreservadas para testes de bioatividade e citotoxicidade de novos cimentos endodônticos. Para isolamento das células, deverão ser testados dois métodos: explant + tripsina e tratamento enzimático com colagenase. Uma vez estabelecido o sistema de cultivo das células isoladas, as mesmas serão caracterizadas com uso de marcadores específicos para osteogênese como a proteína morfogênica óssea 7 (BMP-7) e a sialoproteína de dentina (DSP); e pela formação de nódulos de mineralização nessas culturas através dos ensaios Alizarin Red e Fosfatase Alcalina. Após instituída a manutenção das células em cultura, serão realizados ensaios de citotoxicidade (MTT e Azul de Trypan) com as culturas isoladas comparando-as com linhagens imortalizadas de fibroblastos (mPDL) e células osteoblásticas (SAOS-2), utilizando os seguintes cimentos endodônticos experimentais: 1) Cimento Portland (CP); 2) MTA Branco (Angelus); 3) CP + 30% ONb microparticulado; 4) CP + 30% ONb nanoparticulado.