Perfil de microRNAs presentes no sêmen e embriões bovinos e sua relação com a fertilidade

Resumo

O sêmen bovino, fluido corporal sujeito a mudanças ambientais, que podem alterar sua qualidade e influenciar as taxas de sobrevivência dos espermatozoides, apresenta diversas moléculas ainda não descritas. Dentre elas estão os microRNAs, reconhecidos como fundamentais para a fecundação e desenvolvimento embrionário inicial. Entretanto, existem poucos estudos relacionando o perfil dos microRNAs seminais e a fertilidade em bovinos. Portanto, nossa hipótese é que miRNAs presentes no sêmen estão associados à fertilidade. Para isso, o estudo pretende investigar os miRNAs presentes em espermatozoides e plasma seminal bovino, e relacioná-los com o desenvolvimento embrionário in vitro e in vivo, e com os índices de fertilidade a campo. Dois experimentos serão executados. O primeiro experimento avaliará a qualidade espermática e o perfil de miRNAs espermáticos e do plasma seminal. Serão utilizados 6 touros com diferentes qualidades espermáticas sendo feitas 3 colheitas de sêmen de cada touro (n=18). O sêmen e o plasma seminal serão criopreservados. Duas palhetas com espermatozoides serão descongeladas e avaliações da cinética espermática, integridade das membranas plasmática, acrossomal e mitocondrial e do perfil de microRNAs dos espermatozoides serão realizadas. O plasma seminal será descongelado e avaliado o perfil de miRNAs presente. No experimento 2 será realizada a produção in vitro e in vivo de embriões e a inseminação artificial de vacas com o sêmen criopreservado no experimento 1. Os dados obtidos (taxa de blastocisto, qualidade embrionária e perfil de microRNAs dos embriões obtidos in vitro e in vivo e taxa de prenhez) serão comparados entre os grupos determinados no experimento 1. Os dados dos diferentes grupos definidos pelo experimento 1 serão submetidos à análise de variância e teste de Tukey com nível de significância de 5%. Espera-se encontrar miRNAs associados com a fertilidade. Resultados desse projeto servirão para criar novas ferramentas de análise de ejaculados bovinos.