Efeito de diferentes protocolos de irrigação na adesão e diferenciação de células-tronco da papila apical

Resumo

Em procedimentos endodônticos regenerativos (REPs) a desinfecção do sistema de canais radiculares com soluções irrigadoras e medicamentos é crucial. No entanto, os irrigantes podem alterar a dentina o que pode afetar a adesão e sobrevivência das células-tronco. Portanto, os objetivos deste estudo são investigar se o tratamento da dentina com diferentes protocolos de irrigação afetam a adesão e diferenciação de células-tronco da papila apical (SCAPs) e analisar se as alterações fenotípicas das SCAPs estão relacionadas com os componentes bioquímicos da superfície da dentina. Uma linha SCAP caracterizado serão usados em todas as experiências. As SCAPs serão selecionadas, cultivadas e semeadas em discos de dentina tratados com diferentes protocolos de irrigação endodôntica. Após 3 dias de cultura, a adesão das células será avaliada pela densidade celular, níveis de expressão do gene fibronectina 1 utilizando reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (qRT-PCR), e microscopia eletrônica de varredura. Após 21 dias de cultura, uma matriz de PCR será utilizada para verificar a expressão de 84 genes relacionados com a identificação, o crescimento e diferenciação de células-tronco, e a calcificação será investigada usando coloração com vermelho de alizarina S. Todos os experimentos serão repetidos, pelo menos em triplicata sob três condições independentes. Os dados serão apresentados como mediana e valores mínimos e máximos. Os testes não-paramétricos U de Mann-Whitney e Kruskal-Wallis serão realizados para comparar a densidade celular e os níveis de adesão e expressão dos genes. Será aplicado o teste de Regressão Linear Múltipla para determinar se existe correlação entre a densidade e a adesão das células e as alterações fenotípicas das SCAPs com a rugosidade, a molhabilidade e composição da dentina, dados coletados durante a realização da bolsa no Brasil. Todas as hipóteses serão testadas com um nível de confiança de 95%. (AU)