Influência dos exossomos derivados de oligodendrócitos na terapia celular da encefalomielite autoimune experimental

Resumo

A esclerose múltipla é uma doença inflamatória crônica do sistema nervoso central caracterizada pela destruição autoimune da bainha de mielina que conduz o paciente ao déficit funcional irreversível e progressivo. Estudos pré-clínicos com o uso de células-tronco neurais já evidenciaram o seu potencial na regeneração neuronal e na remielinização. Entretanto, apenas o emprego da terapia celular ainda não foi suficiente para alcançar níveis terapêuticos satisfatórios. Considerando essas limitações, surge a necessidade de associar a terapia celular com outros protocolos coadjuvantes. Nesse contexto, as vesículas extracelulares podem contribuir com a comunicação intercelular, estimulando a produção de proteínas e lipídios da remielinização e oferecendo suporte trófico aos axônios. À vista disso, esse projeto de pesquisa tem o objetivo de avaliar a eficácia terapêutica da associação entre células-tronco neurais e vesículas extracelulares derivadas de oligodendrócitos em modelo animal da esclerose múltipla. Para isso, o projeto será realizado em três fases experimentais. Na fase 1 as células-tronco neurais serão isoladas e cultivadas de duas regiões distintas do sistema nervoso central. A análise da expressão gênica por RT -qPCR irá determinar a fonte celular mais apropriada para a fase 2. Na fase 2 as células-tronco neurais serão diferenciadas em oligodendrócitos, as vesículas extracelulares serão isoladas por ultracentrifugação e caracterizadas através do método de detecção de proteínas por Western Blotting. A fase 3 consiste na realização dos protocolos terapêuticos em 20 camundongos C57BL/6 que serão distribuídos em grupos conforme o protocolo instituído. Os tratamentos serão avaliados clinicamente através de escores e microscopicamente por histologia e imunohistoquímica. Com esse estudo esperamos obter um protocolo terapêutico eficiente e a melhor compreensão do papel dos exossomos como possíveis coadjuvantes na terapia celular.