O(s) mecanismo(s) de transdução empregado(s) por 6-nitrodopamina e 6-cianodopamina em plaquetas humanas e linhagens celulares cultivadas

Resumo

As células endoteliais modulam a reatividade vascular através da liberação de mediadores como óxido nítrico e endotelina. O dogma corrente é que as catecolaminas modulam o tônus vascular, cronotropismo e inotropismo cardíaco através da liberação das mesmas de terminais adrenérgicos, e com ação em receptores a e beta-adrenérgicos. Identificamos através de espectrometria de massa liberação basal de dopamina dependente de endotélio em tecidos vasculares humanos (artérias e veia umbilicais, estruturas essas conhecidas por não apresentarem terminais nervosos) e de aorta de Chelonoidis carbonaria, indicando que a dopamina de origem endotelial tem o potencial modular a reatividade vascular. Identificamos também a liberação de uma nova catecolamina, 6-nitrodopamina (6-ND), de tecidos humanos (artérias e veia umbilicais; artérias e veias periféricas como poplítea, femoral; vas deferens humano) e de tecidos vasculares de animais (ducto torácico, artéria femoral, renal, carótida, coronária e pulmonar de Sus domesticus; aorta de Chelonoidis carbonaria; aorta de Panterophis guttatus, aorta e artéria pulmonar de Callithrix sp), átrio e ventrículos de Rattus norvegicus, camundongo black C57BL/6 e de Sus domesticus e de vas deferens de Rattus norvegicus. A liberação de 6-ND é reduzida com incubação prévia do tecido com o inibidor da sintase de óxido nítrico L-NAME, ou quando o tecido é proveniente de animais (Rattus norvegicus) cronicamente tratados com L-NAME. A 6-ND possui várias ações no sistema cardiovascular. É um potente vasodilatador, atuando através de antagonismo de receptores dopaminérgicos D2-like, e cem vezes mais potente que a noradrenalina e a adrenalina e dez mil vezes mais potente que a dopamina como agente cronotrópico em átrio isolado de Rattus norvegicus. Tem efeito contrátil em vas deferens de Rattus norvegicus e humano, e esse feito é através de sua interação com receptor específico para 6-ND, o qual é bloqueado por antidepressivos tricíclicos, antagonistas a-adrenérgicos e antagonistas beta-adrenérgicos. Com base nos experimentos acima, o objetivo seria verificar se diferentes linhagens celulares apresentam liberação basal de 6-ND e outras novas catecolaminas, como 6-nitrodopa, 6-nitroadrenalina, 6-cianodpamina e, em caso afirmativo, se apresentam aumento no cálcio intracelular após estimulação com estas novas catecolaminas.