DESENVOLVIMENTO DE UM GENOSSENSOR BASEADO EM NANOPARTICULA DE PRATA ENCAPSULADO EM POLÍMERO Pi-CONJUGADO PARA O MONITORAMENTO DE miRNA EM CELULAS PATOGENICAS

Resumo

A investigação de relações entre RNA não codantes (miRNA) e as progressões de processos infeciosos e neoplásicos proporcionaram a elaboração de novas estratégias para detecção de miRNA específicos como biomarcadores. Isso proporciona o estudo do mecanismo de monitoramento de patologias e na eficácia de tratamentos de doenças. O objetivo do presente projeto de pesquisa será o desenvolvimento de um dispositivo baseado em nanocompósito de nanopartículas de prata (AgNPs) encapsulado em azopolímero de Bismarck Brown Y (poli(azoBBY)) para o sensoriamento impedimétrico do nível global de miRNA-122 em células. patogénicas. A plataforma sensorial deverá ser construída por eletropolimerização em etapa única in situ em solução contendo o monómero de azo-BBY e o nitrato de prata em meio ácido de HNO3 sobre asuperfície do elétrodo de ouro intergitalizado. A biorrecognição do genossensor será elaborado pela imobilização da sonda de DNA tiolado (ssDNA) na superfície do dispositivo revestido com blendas de azopolímero-AgNPs. Em seguida deste processo, a plataforma será analisada por microscopia eletrônica de varredura (MEV) e microscopia de força atômica (AFM) para o estudo da morfologia do nanocompósito. A aplicação de técnica de espectroscopia de impedância eletroquímica permitirá avaliar os fenômenos interfaciais do dispositivo, a fim de realizar uma investigação mais detalhada das características e propriedades eletroquímicas do mesmo. O mecanismo de resposta do genossensor será baseado nas alterações dos valores de impedância do sistema pela interação do analito miRNA-122 em solução de tampão fosfato em pH fisiológico com a sonda de ssDNA tiolado, imobilizado sobre rede sensível pi-conjugada do nanomaterial azopolímero-AgNPs formado. Subsequentemente, a etapa final do projeto visa a aplicação da plataforma quimioresistora no monitoramento quantitativo do nível global de miRNA-122 em células patogénicas de HPV por ensaio in vitro. Na etapa em questão, o projeto de pesquisa será desenvolvido no grupo de pesquisa em fisiologia (GPFis) - UNESP, sob a supervisão da Profª Drª Patrícia M. Seraphim, que contém vasta experiência em estudos com aplicação biológica. Como colaboração internacional, serão estudadas as reações biológicas de transferência de elétrons,mecanismos de sinalizações redox e suas interações interfaciais com a plataforma sensorial no laboratório coordenada/dirigida pela Profª Drª Felismina Teixeira Coelho Moreira da University ofPorto (Portugal).