Circovírus suíno 2b: isolamento e taxa de mutação em linhagem de célula de macrófagos (J744)

Autor(es)

Alessandra Marnie Martins Gomes de Castro ^[1] ; Josete Garcia Bersano ^[2] ; Sheila Oliveira Silva Souza ^[3] ; Renato Akio Ogata ^[4] ; Julia Mitico Nara ^[5] ; Leonardo José Richtzenhain ^[6]

Afiliação do(s) autor(es)

^[1] Faculdade Metropolitanas Unidas - Brasil

^[2] Instituto Biológico. Centro de Sanidade Animal. Laboratório de Doenças de Suínos “Washington Sugay” - Brasil

^[3] Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia. Departamento de Medicina Veterinária Preventiva e Saúde Animal - Brasil

^[4] Instituto Biológico. Centro de Sanidade Animal. Laboratório de Doenças de Suínos “Washington Sugay” - Brasil

^[5] Instituto Biológico. Centro de Sanidade Animal. Laboratório de Doenças de Suínos “Washington Sugay” - Brasil

^[6] Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia. Departamento de Medicina Veterinária Preventiva e Saúde Animal - Brasil

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: Arq. Inst. Biol.; v. 84, 2017-08-03.

Resumo

RESUMO: Porcine circovirus 2 (PCV2) está associado a vários sinais clínicos que são designados coletivamente como Circovirose e tem grande impacto na suinocultura. O isolamento viral é classicamente realizado em células da linhagem PK-15, contudo outras células têm sido testadas. Apesar dos avanços nos estudos com PCV2, o isolamento ainda é um desafio. Diante da dificuldade de manutenção dessas linhagens celulares comumente utilizadas associadas à necessidade do uso de substâncias tóxicas para o isolamento de PCV2, os objetivos do presente trabalho foram descrever o primeiro isolamento de Porcine circovirus 2b em linhagens de células de macrófago (J744) e verificar a taxa de mutação nesse sistema. Uma amostra de pulmão foi submetida ao sequenciamento e agrupada ao genótipo PCV2b. Essa amostra foi utilizada para inocular uma garrafa de J744 (com 30% de confluência em meio RPMI com 10% de soro fetal bovino) e submetida a cinco passagens, as quais foram acompanhadas por reação em cadeia da polimerase quantitativa (PCRq). As cargas virais inicial e final foram de 2,90 × 103 e de 4,45 × 108 cópias de DNA/µL para PCV2b, respectivamente. O sequenciamento confirmou o isolamento e descartou o coisolamento de mais de um genótipo. Após cinco passagens, o isolado apresentou identidade de 99,7%, com descrição de cinco mutações pontuais, uma sinônima e quatro não sinônimas, observadas nas regiões do gene cap e rep. Os resultados obtidos demonstram que as células J744 apresentam a susceptibilidade, e a instabilidade do vírus em J744 será importante para a compreensão do vírus. (AU)

• Processo FAPESP: 07/57115-3 - Circovirus suíno tipo 2 (PCV-2): patogenia comparada dos subtipos A e B e efeitos sobre o desempenho zootécnico de suínos experimentalmente infectados com amostras brasileiras
• Beneficiário: Alessandra Marnie Martins Gomes de Castro
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Jovens Pesquisadores
• Processo FAPESP: 09/09175-2 - Circovírus suíno tipo 2 (PCV-2): patogenia comparada dos subtipos A e B e efeitos sobre o desempenho zootécnico de suínos experimentalmente infectados com amostras brasileiras
• Beneficiário: Alessandra Marnie Martins Gomes de Castro
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Jovens Pesquisadores