Produção da proteína recombinante EMA-1 e sua aplicação para o diagnóstico baseadono imuno ensaio enzimático de Theileria equi em equinos do Estado de São Paulo, Brasil

Autor(es)

Cristiane Divan Baldani ^[1] ; Eduardo Hilario ^[2] ; Andréa Cristina Higa Nakaghi ^[3] ; Maria Célia Bertolini ^[4] ; Rosangela Zacarias Machado ^[5]

Afiliação do(s) autor(es)

^[1] Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro. Instituto de Veterinária. Departamento de Medicina e Cirurgia Veterinária

^[2] University of California-Riverside. Department of Biochemistry

^[3] Universidade Estadual Paulista. Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias. Departamento de Patologia Veterinária

^[4] Universidade Estadual Paulista. Departamento de Bioquímica e Tecnologia Química

^[5] Universidade Estadual Paulista. Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias. Departamento de Patologia Veterinária

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: Revista Brasileira de Parasitologia Veterinária; v. 20, n. 1, p. 54-60, 2011-03-00.

Resumo

A proteína de superfície eritrocitária, Antígeno 1 do Merozoíta de Theileria equi (EMA-1), é um potencial candidato para o desenvolvimento de antígenos de valor diagnóstico para a piroplasmose equina. Com o objetivo de estabelecer um método de diagnóstico efetivo e prático, o gene EMA-1 da amostra Jaboticabal - SP de T. equi foi clonado e expresso em Escherichia coli contendo uma cauda de poli-histidina (His6-EMA1). O EMA-1 expresso reagiu com anticorpos específicos no Western blot e apresentou peso molecular aparente de 34 kDa, sendo altamente consistente com seu valor teórico. A sequência nucleotídica do gene EMA-1 da amostra Jaboticabal foi analisado comparativamente com outras sequências públicas, e os resultados indicam elevado grau de homologia com amostras de diversos países. A proteína recombinante purificada His6-EMA1 foi testada no ensaio imunoenzimático (ELISA) para a detecção de anticorpos anti-T. equi em equinos. O teste de ELISA diferenciou-se claramente entre soros de equinos infectados por T. equi, soros de animais infectados por Babesia caballi e soro normal de equino. Amostras de soros coletadas de equinos do Estado de São Paulo, sudeste do Brasil, foram examinadas para o diagnóstico da infecção por T. equi pelo ELISA. Das 170 amostras analisadas, 95,88% (163/170) foram positivas para T. equi. Os resultados sugerem que a proteína His6-EMA1 expressa em E. coli pode ser um antígeno confiável para diagnóstico imunológico pelo teste de ELISA, e que T. equi merece grande atenção no Estado de São Paulo. (AU)

• Processo FAPESP: 03/12793-3 - Avaliacao da reposta imune humoral em equinos naturalmente infectados por babesia equi pela utilizacao de antigeno recombinante ema-1 e antigenos parcialmente purificados e caracterizacao antigenica e...
• Beneficiário: Cristiane Divan Baldani
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Processo FAPESP: 04/05223-9 - Avaliação da resposta imune em equinos naturalmente infectados por Babesia equi pela utilização de antígeno recombinante EMA-1 e antígenos parcialmente purificados e caracterização antigênica e molecular da cepa, Jaboticabal - SP
• Beneficiário: Rosangela Zacarias Machado
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular