Detecção de oocistos de Cryptosporidium parvum em amostras fecais de bezerros pela reação de imunofluorescência direta

Autor(es)

Weslen Fabricio Pires Teixeira ^[1] ; Willian Marinho Dourado Coelho ^[2] ; Cáris Maroni Nunes ^[3] ; Marcelo Vasconcelos Meireles ^[4]

Afiliação do(s) autor(es)

^[1] Universidade Estadual Paulista. Faculdade de Medicina Veterinária

^[2] Universidade Estadual Paulista. Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias

^[3] Universidade Estadual Paulista. Faculdade de Medicina Veterinária

^[4] Universidade Estadual Paulista. Faculdade de Medicina Veterinária

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: Revista Brasileira de Parasitologia Veterinária; v. 20, n. 4, p. 269-273, 2011-12-00.

Resumo

O objetivo deste estudo foi produzir um conjugado contendo anticorpos policlonais anti-Cryptosporidium parvum e padronizar a Reação de Imunofluorescência Direta (RID), para detecção de oocistos de C. parvum em amostras fecais de bezerros. Para produção de anticorpos policlonais anti-C. parvum, dois coelhos da raça Nova Zelândia foram imunizados com uma solução purificada de oocistos de C. parvum e adjuvante de Freund. A purificação da fração de imunoglobulina G (IgG) foi realizada por meio de precipitação em sulfato de amônio e cromatografia em coluna de DEAE celulose. A titulação dos anticorpos policlonais anti-C. parvum foi determinada por meio de ensaio imunoenzimático (ELISA). A fração IgG de coelho anti-C. parvum foi conjugada com isotiocianato de fluoresceína, e a padronização da RID foi feita utilizando-se várias diluições do conjugado, em lâminas positivas para C. parvum. Foi pesquisada também a presença de reatividade cruzada do conjugado anti-C. parvum com C. serpentis, C. andersoni, Escherichia coli, Eimeria sp. e Candida sp.. A produção do conjugado anti-C. parvum foi bem sucedida, sendo possível a padronização da RID para detecção de oocistos em fezes. Foi também observada reatividade cruzada dos anticorpos policlonais anti-C. parvum, com C. andersoni e C. serpentis. (AU)

• Processo FAPESP: 08/57380-1 - Padronização da reação de imunofluorescência direta para detecção de oocistosde Cryptosporidium parvum em amostras fecais
• Beneficiário: Marcelo Vasconcelos Meireles
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular