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Enhancement of Human Prolactin Synthesis by Sodium Butyrate Addition to Serum-Free CHO Cell Culture

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Autor(es):
Goulart, Herbert Rodrigues ; Arthuso, Fernanda dos Santos ; Nucci Capone, Marcos Vinicius ; de Oliveira, Tais Lima ; Bartolini, Paolo ; Jorge Soares, Carlos Roberto
Número total de Autores: 6
Tipo de documento: Artigo Científico
Fonte: JOURNAL OF BIOMEDICINE AND BIOTECHNOLOGY; v. N/A, p. 11-pg., 2010-01-01.
Resumo

Sodium butyrate (NaBu) has been used as a productivity enhancer for the synthesis of recombinant proteins in Chinese hamster ovary (CHO) cells. Thus, the influence of NaBu on the production of recombinant human prolactin (hPRL) from CHO cells was investigated for the first time. CHO cell cultures were submitted to a treatment with different concentrations of NaBu (0.25 to 4 mM). Quantitative and qualitative analyses by reverse-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) and Western blot or SDS-PAGE, carried out directly on CHO-conditioned medium, showed that the highest hPRL expression was obtained with 1 mM NaBu. In vitro biological assays based on noble rat lymphoma (Nb2) and mouse pro-B lymphoma (Ba/F3-LLP) cells were carried out on purified hPRL. Its bioactivity in the presence of NaBu was not apparently different from that of the First International Reference Reagent of recombinant hPRL (WHO 97/714). Our results show that NaBu increased the synthesis of recombinant hPRL in CHO cells, apparently without compromising either its structure or function. (AU)

Processo FAPESP: 07/59709-8 - Síntese e caracterização de prolactina de camundongo (mPRL) em Escherichia coli
Beneficiário:Fernanda dos Santos Arthuso
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Processo FAPESP: 07/54493-7 - Inibição do efeito pró-apoptótico do butirato de sódio: um método alternativo para incrementar a biossíntese de prolactina e de outros hormônios hipofisários humanos em células CHO
Beneficiário:Herbert Rodrigues Goulart
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Processo FAPESP: 07/59540-3 - Síntese e caracterização de prolactina de camundongos (mPRL) e de seu análogo (S177D-mPRL) em Escherichia coli
Beneficiário:Carlos Roberto Jorge Soares
Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
Processo FAPESP: 05/60826-3 - Desenvolvimento de bioprocesso para produção de larga escala de hormônios recombinantes e seus antagonistas em cultura de células CHO em biorreatores
Beneficiário:Carlos Roberto Jorge Soares
Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
Processo FAPESP: 06/52973-9 - Sintese, purificacao e caracterizacao da prolactina humana glicosilada produzida em celulas de ovario de hamster chines.
Beneficiário:Susana da Rocha Heller
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado