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(Referência obtida automaticamente do Web of Science, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores.)

Insertional transposon mutagenesis in the Xylella fastidiosa citrus variegated chlorosis strain with transposome

Texto completo
Autor(es):
Koide, Tie [1] ; Silva Neto, José F. da ; Gomes, Suely Lopes ; Marques, Marilis V.
Número total de Autores: 4
Afiliação do(s) autor(es):
[1] Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Química. Departamento de Bioquímica - Brasil
Número total de Afiliações: 4
Tipo de documento: Artigo Científico
Fonte: Current Microbiology; v. 48, n. 4, p. 247-250, Apr. 2004.
Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética
Assunto(s):Xylella fastidiosa   Mutagênese   Recombinases   Transposon resolvases
Resumo

To overcome the difficulty in obtaining mutants of the citrus strains of Xylella fastidiosa, we evaluated mutagenesis using the transposome system as a tool for the isolation of a large number of mutants. Electroporation of a commercial transposome system in X. fastidiosa CVC (Citrus Variegated Chlorosis) strain J1a12 yielded an efficiency of 1.2 × 103 kanamycin (Km)-resistant clones per g of DNA. Southern blot analysis demonstrated that the transposon was randomly inserted, and nucleotide sequence analysis indicated the presence of 9 bp direct repeats flanking the transposon insertion site. Analysis by PCR of one of the insertion mutants (clone J15) showed that the transposon was stable after eight passages in solid media. These results show that the transposome system can be used to generate a random mutant library of Xylella fastidiosa CVC strain. (AU)

Processo FAPESP: 98/16251-0 - Establishment of conditions for the disruption genes potentially involved in Xylella fastidiosa pathogenesis
Beneficiário:Suely Lopes Gomes
Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Programa GENOMA