Construção de uma biblioteca de fragmentos de anticorpos monoclonais de galinhas com cadeia única (scFv) por phage display com reatividade cruzada para estirpes heterólogas do vírus da bronquite infecciosa aviária

Autor(es)

Fernandes, Camila Cesário ^[1] ; Caetano, Aline Gonçalves ; Gonçalves, Mariana Costa Mello ; Montassier, Maria de Fátima Silva ; Gibertoni, Aliandra Maura ; Montassier, Hélio José ^[6]

Afiliação do(s) autor(es)

^[1] Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias. - Brasil

^[6] Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias. - Brasil

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: Ciência Rural; v. 40, n. 6, p. 1347-1353, 2010.
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária
• Assunto(s): Viroses em animais Bronquite infecciosa animal Aves Anticorpos monoclonais

Resumo

Anticorpos monoclonais constituem a base de vários testes usados na detecção e na identificação de antígenos. Nesse contexto, tais imuno-reagentes têm sido extensivamente empregados na identificação de estirpes virais envolvidas na etiologia de surtos de bronquite infecciosa a campo, permitindo o aperfeiçoamento das técnicas de detecção e caracterização antigênica do vírus da bronquite infecciosa das galinhas (VBI). No presente estudo, uma biblioteca de fragmentos de anticorpos de galinha originalmente preparada por phage display contra a estirpe vacinal (H120) do VBI foi usada para a seleção de fragmentos de anticorpos recombinantes com reatividade cruzada para as estirpes heterólogas IBVPR01 e IBVPR05, isoladas de surtos a campo no Brasil e a estirpe SE-17, isolada nos Estados Unidos. Após três ciclos de panning, foi identificado, pelo ELISA, um conjunto de 15 anticorpos scFv expressos em fagos e com reatividade cruzada para essas mesmas estirpes do VBI. A análise por Western-blotting revelou que dois desses clones apresentavam fagos expressando fragmentos de anticorpos monoclonais com reatividade cruzada para a nucleoproteína N das três estirpes do VBI e também para a forma recombinante dessa nucleoproteína derivada da estirpe M41. Concluindo, os fragmentos de anticorpos monoclonais recombinantes scFv-N produzidos em fagos interagem com um epítopo mais conservado da proteína N do VBI e apresentam um grande potencial para utilização na detecção e no diagnóstico direto desse vírus. (AU)

• Processo FAPESP: 07/57902-5 - Produção de anticorpos monoclonais contra isolados de campo do vírus da bronquite infecciosa das galinhas utilizando a técnica de Phage Display
• Beneficiário: Camila Cesario Fernandes
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado