Influência do flúor na atividade de fosfatases e metaloproteinases de matriz 2 e 9, em osteoblastos.

Resumo

O objetivo deste projeto será avaliar o comportamento de osteoblastos humanos tratados com diferentes doses de flúor. Células da linhagem hFOB 1.19 serão incubadas com diferentes concentrações (5 µM, 10 µM, 100 µM e 1 mM) de fluoreto de sódio (NaF), a 37oC, nos tempos de 24, 48, 72, 96 e 120 horas. As células serão coletadas ao final dos respectivos períodos experimentais e serão avaliadas quanto à viabilidade celular (contagem de células, redução do MTT e captação do Vermelho Neutro), atividade de enzimas: fosfatase ácida total (FAT), fosfatase lisossomal (FAL) e proteína tirosina fosfatase (PTP) e síntese de alguns transcritos e proteínas: metaloproteinases de matriz (MMPs 2 e 9), por meio de zimografia. Após a preparação das proteínas dos osteoblastos humanos, as mesmas serão submetidas à eletroforese e zimografia. Os géis dos grupos controle e tratados serão escaneados utilizando-se o ImageScanner e analisados com o software ImageMaster Platinum. A análise paramétrica será realizada utilizando análise de variância (teste de Tukey se p<0,05).