Efeito modulador da silibinina sobre a produção de citocinas e atividade fungicida de monócitos humanos, infectados in vitro com Paracoccidioides brasiliensis

Resumo

A silibinina é o componente mais ativo da silimarina (Silybum marianum) uma mistura de flavonóides polifenólicos que possui efeitos antiinflamatórios, citoprotetores, antifibróticos e anticarcinogênicos. O efeito modulatório da silibinina sobre a função de monócitos desafiados com Paracoccidioides brasiliensis ainda não foi demonstrada. O objetivo do presente trabalho é avaliar o efeito desse flavonóide sobre a expressão e produção de fator de necrose tumoral- alfa (TNF-alfa), interleucina-10 (IL-10), fator de crescimento e transformação beta (TGF-beta1), prostaglandina E2 (PGE2), fator de transcrição nuclear kappa B (NF-kappaB) e atividade fungicida de monócitos humanos, desafiados in vitro com a cepa virulenta de Paracoccidioides brasiliensis (Pb18). Monócitos de sangue periférico serão obtidos de indivíduos saudáveis, doadores do Banco de Sangue do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu, UNESP. As células serão incubadas a 37ºC, em atmosfera constante de 5% de CO2, na ausência ou presença de silibinina nas concentrações de 5 e 50 uM por 60 minutos e, a seguir, desafiadas com Pb18 na proporção monócito-fungo de 50:1 por 4h e 18h. O efeito da silibinina sobre os monócitos infectados será avaliado por: a) produção de citocinas pró e antiinflamatórias como TNF-alfa, IL-10, TGF- beta1 e de PGE2, utilizando a técnica de ELISA; b) expressão de TNF-alfa, IL-10, TGF-beta1 e NF-kB, determinada por citometria de fluxo em períodos a serem determinados e c) recuperação de fungos viáveis para avaliação da atividade fungicida. (AU)