Imobilização multipontual covalente de xilanases: seleção de derivados ativos e estabilizados

Resumo

As xilanases (EC 3.2.1.8; endo-1,4-b-xilanase) e as xilosidases (EC 3.2.1.37; xilana 1,4-b-xilosidase) são glicosidases que catalisam, respectivamente, a hidrólise das ligações 1,4-b-xilosídicas da xilana e a hidrólise de xilooligossacarídeos e xilobiose, formando xilose. As enzimas xilanolíticas de diversos microrganismos têm sido amplamente estudadas na última década, pela importância em vários processos industriais, por exemplo, na clarificação de sucos e vinhos, fabricação de pães e produção de xilose e xilitol; também são usadas nas indústrias de cerveja, ração animal, papel e celulose. Embora sejam bastante empregadas, essas enzimas não possuem todo o seu potencial explorado. A sua imobilização em suportes sólidos oferece muitas vantagens, incluindo o reúso da enzima, a fácil separação do produto e o aumento da estabilidade enzimática. Os objetivos deste trabalho são: a) produzir as enzimas xilanase e xilosidase termofílicas, utilizando um fungo isolado no laboratório (FCUP1), além do Humicola grisea var. thermoidea e do Aspergillus versicolor; b) realizar imobilização multipontual covalente de xilanases e xilosidases termofílicas de fungos filamentosos em suportes sólidos, com caracterização cinética dos derivados mais ativos e estabilizados, comparando-os com as enzimas livres; c) realizar a hidrólise da xilana, utilizando, concomitantemente, os derivados de xilanase e xilosidase; d) avaliar a capacidade de reúso dos derivados ativos e estáveis. Os estudos de imobilização de enzimas termoestáveis do complexo xilanolítico são escassos, porém fundamentais para a otimização e a redução de custos nas diversas aplicações.