Identificação e caracterização de promotores de cana-de-açúcar induzidos por seca

Resumo

A resposta ao estresse hídrico em cana-de-açúcar será estudada através da produção de plantas transgênicas com construções para super-expressão e silenciamento do gene da fosfatasse PP2c identificado por ser induzido cerca de 40 vezes durante períodos de seca. O estudo das respostas de cana-de-açúcar ao estresse hídrico também será feito por identificação, clonagem e caracterização de promotores de cana-de-açúcar dos genes PP2c e deidrina induzidos por seca. Clones contendo esses genes serão identificados em uma biblioteca de BACs contendo o genoma da cana-de-açúcar. Os clones isolados serão utilizados para amplificação das regiões 5"upstream à seqüência codificadora por andamento cromossômico (genome walking) e construções contendo estas regiões promotoras controlando o gene repórter ß-glucoronidase serão obtidas para análise de atividade em ensaios de expressão transiente em folhas de tabaco. As sequências clonadas por genome walking serão sequenciadas e analisadas para identificação de regiões promotoras. Também realizaremos a identificação de prováveis regiões promotoras de genes induzidos por estresse hídrico usando ferramentas de bioinformática e buscas no genoma sequenciado de sorgo. (AU)