Antígenos excretados-secretados (ESAs) de Toxoplasma gondii: Análise da resposta imune de hospedeiros infectados

Resumo

A toxoplasmose é uma infecção cosmopolita com uma pequena porcentagem de indivíduos desenvolvendo a forma clínica. Constitui um sério problema de saúde pública principalmente em gestantes que não tiveram contato prévio com T. gondii e indivíduos soropositivos que desenvolvam algum tipo de imunossupressão como os pacientes que se infectam com o vírus HIV. Nesta população existe uma grande chance de ocorrer a reativação de infecção latente, causando doença neurológica. Assim, T. gondii constitui a causa mais comum de lesões expansivas intracranianas, sendo que no Brasil, a prevalência da toxoplasmose cerebral é alta e com considerável morbidade e mortalidade. Neste contexto, prover um melhor entendimento da resposta imune destes pacientes, avaliando a presença de marcadores sorológicos em diferentes materiais biológicos se faz de extrema importância uma vez que, podem contribuir na progressão da doença e auxiliar no desenvolvimento de estratégias diagnósticas e de controle epidemiológico. O presente projeto pretende estudar alguns aspectos da resposta imune celular e humoral na co-infecção toxoplasmose cerebral/Aids utilizando como antígeno proteínas excretadas/secretadas por taquizoítos de T. gondii (ESAs), que serão produzidas a partir da adaptação das formas "taquizoíto" (cepa RH) em culturas de tecidos livres de soro fetal bovino. O primeiro passo será padronizar a produção dos antígenos (taquizoítos íntegros, antígeno bruto e ESA) para utilização nos testes sorológicos, a partir dessa nova linhagem celular. A seguir a ESA-ELISA será adaptada para avaliar anticorpos anti-ESAs em líquido cefalorraquidiano (LCR) proveniente de pacientes com Aids e toxoplasmose cerebral, Aids e outras doenças neurológicas. Os resultados gerados serão analisados por comparação com os resultados entre os grupos. A terceira etapa do projeto será a análise das subclasses de imunoglobulinas e citocinas nos soros dos pacientes com Aids e toxoplasmose cerebral. Antes de realizar os experimentos, as reações deverão ser padronizadas com amostras padrões. Incluem-se nestas padronizações as dosagens das citocinas e subclasses de imunoglobulinas. Conjuntamente serão processadas amostras de pacientes com Aids e outras doenças neurológicas, e indivíduos com toxoplasmose assintomática e normais. Os resultados gerados serão analisados por comparação entre os grupos e poderão contribuir para o diagnóstico mais específico da toxoplasmose cerebral, haja vista o diagnóstico por imagens nem sempre ser conclusivo, além de não ser tão acessível à população que o necessita.