Estudo caso-controle de alterações genéticas em DNA fecal e tecidual em pacientes com câncer colorretal

Resumo

O câncer colorretal (CCR) representa o terceiro câncer mais incidente em todo o mundo, incluindo o Brasil. O risco estimado para a população brasileira é de 13 novos casos em 100.000 homens e de 15, em 100.000 mulheres.Na carcinogênese colorretal ocorrem várias alterações gênicas. A perda de função da proteína APC, decorrente de mutação genética no gene supressor de tumor APC, estimula a proliferação celular e é descrita como a primeira alteração na carcinogênese colorretal. Nos genes K-ras ou BRAF, as mutações podem ativar permanentemente a expressão das proteínas transcritas e promover a progressão da lesão no epitélio colônico com formação do adenoma. Mutações do gene TP53 ("Guardião do Genoma"), podem ocorrer com inativação da proteína, impede sua ação no ciclo celular e indução de apoptose. Estas alterações que ocorrem no tumor podem também ser encontradas nas fezes. O objetivo deste estudo é detectar mutações destes genes nas fezes e comparar com a presença dos mesmos no tumor. Serão estudados 150 indivíduos com indicação de colonoscopia e divididos em 3 sub-grupos conforme os achados: normal, pólipo e câncer. Nestes pacientes será realizada a análise de mutações nos genes TP53, K-ras, APC e BRAF em DNA nas fezes e nos tecidos pela metodologia RANPLEXCRC (Randox Clinical Diagnostic Solutions), baseada na detecção simultânea de 28 mutações nesses genes através de microarray. O procedimento para identificação tem como inicio o pré-enriquecimento do DNA, com primers contendo as mutações, através de duas reações MPCR (Reações de Cadeia de Polimerase Multiplex). Uma primeira MPCR permite amplificar simultaneamente os genes K-ras, BRAF e TP53 e a segunda, o gene APC. Posteriormente serão realizados a hibridização, ligação e amplificação de probes para análise por microarray (Biochip Array Technology). O intuito desta pesquisa é estudar a sensibilidade e especificidade de uim método diagnóstico não invasivo no diagnóstico de câncer colorretal e de pólipos. (AU)