Corpo lúteo e diestro na espécie canina: modelo de estudo para alterações metabólicas hormônio-dependentes

Resumo

Problemas metabólicos como resistência insulínica, incapacidade de manutenção da glicemia em níveis adequados são relatos frequentemente associados ao ciclo estral da mulher. Na espécie humana, a fase luteínica do ciclo estral apresenta duração de 14 dias, nos quais os níveis séricos de estradiol-17beta (E2) e progesterona (P4) oscilam concomitantemente. O ciclo estral das cadelas difere das demais espécies domésticas e da espécie humana, no entanto, alterações metabólicas como a resistência insulínica, acarretando complicações como Diabetes mellitus também foram descritas associadas à fase luteínica, que nas cadelas não prenhes pode durar entre 60 e 75 dias. Este período, denominado de diestro na espécie canina, é caracterizado por apresentar elevação da concentração plasmática de P4 e flutuações da concentração de E2, não necessariamente de maneira concomitante. A glicose é uma molécula transportada, na maioria das células, por proteínas carreadoras. O processo de instalação da resistência insulínica é caracterizado por alterações teciduais da expressão de algumas proteínas transportadoras de glicose, como o GLUT4, presente nos músculos e no tecido adiposo, principalmente, cuja diminuição é característica dos quadros de resistência insulínica. Até o momento não existem relatos de influências das alterações hormonais do ciclo estral sobre a expressão desta proteína transportadora de glicose no corpo lúteo, órgão responsável pela secreção hormonal de E2 e P4 durante o diestro. Hipotetiza-se o corpo lúteo expresse GLUT4 e que esta expressão seja regulada por hormônios esteroides bem como pela insulina, de acordo com as alterações hormonais verificadas durante o ciclo estral. Por apresentar uma fase luteínica longa, a cadela constitui modelo de estudo para alterações hormônio-dependentes relacionadas ao diestro. Para testar esta hipótese, 32 cadelas selecionadas para cirurgia de ovariosalpingo-histerectomia (OSH) eletiva serão divididas em 8 grupos (n = 4 por grupo). As cadelas serão submetidas à OSH em intervalos de 10 dias entre os dias 10 e 80 após a ovulação (dia da ovulação é considerado o dia em que a concentração sérica de P4 atingiu valor igual ou superior a 5ng/ml). Os ovários serão coletados e dissecados, alguns corpos lúteos (CLL) serão congelados em nitrogênio líquido para extração de RNA, confecção de cDNA e realização dos experimentos de expressão gênica e proteica do GLUT4 e alguns genes reguladores, como HIF-1a e NF-kB. O restante dos CLL serão submetidos à cultura celular na qual verificaremos a influência de adição de hormônios sobre a expressão do gene da GLUT4 e seus moduladores. Será coletado sangue para dosagem da glicemia, insulinemia, P4 e E2. Além da caracterização detalhada da influência das variações hormonais sobre os processos metabólicos que ocorrem durante o diestro, pretende-se compreender e sugerir mecanismos de intervenção no tratamento da resistência insulínica associada à fase luteínica da própria cadela e mesmo da mulher. (AU)