Efeito do diabete induzido por streptozotocin na matriz extracelular e no músculo estriado uretral em ratas prenhes

Resumo

Diabetes mellitus durante a gestação está associado com altos níveis de incontinência urinária e disfunção muscular do assoalho pélvico. Em trabalho experimental, nosso grupo de estudo verificou alterações como atrofia, adelgaçamento e mudança na distribuição e no tipo de fibra muscular estriada na uretra em ratas prenhes diabéticas. Neste projeto, iremos aprofundar o estudo anterior e avaliar as alterações morfológicas e moleculares da matriz extracelular e do músculo estriado uretral de ratas prenhes diabéticas submetidas à cesárea. Para isso, serão avaliadas 112 ratas Wistar distribuídas em quatro grupos: virgem, prenhe, diabético virgem e diabético prenhe. Os três primeiros grupos serão considerados como controle do grupo principal, o diabético prenhe. O diabete será induzido com streptozotocin na dose de 40mg/kg de peso corpóreo. O critério de inclusão será glicemia acima de 300mg/dL. No final do experimento, as ratas serão anestesiadas, eutanasiadas e a vagina e a uretra serão retiradas em monobloco, congeladas em nitrogênio líquido e mantidas a -80°C. O bloco será submetido a cortes em criostato (6 µm de espessura) e serão então submetidos às colorações citoquímicas para componentes da matriz extracelular; imunoistoquímica para marcação de fibras lentas e rápidas e componentes da matriz, western blotting para componentes da matriz e microscopia eletrônica de transmissão para análise da musculatura estriada uretral. Serão feitas análises morfométricas de espessura da camada muscular, espessura da camada de lâmina própria e da área de tecido conjuntivo ao redor do músculo estriado uretral dos quatro grupos. A nossa hipótese é que, no binômio diabete e prenhez, a análise conjunta do músculo estriado uretral e da matriz extracelular evidencie que a alteração da composição deste músculo induz à remodelação tecidual na qual a matriz assume papel fundamental. Com este estudo, espera-se compreender melhor os efeitos estruturais, ultraestruturais e moleculares da interação diabetes e prenhez sobre a matriz extracelular e o músculo estriado uretral para conclusão da orientação de doutorado e outras orientações de Iniciação Científica junto aos alunos de Graduação de nossa Instituição e do Instituto de Biociências da UNESP Botucatu.