Avaliação da citotoxicidade, genotoxicidade e bioatividade de diferentes tipos de cimento Portland e associações radiopacificadores micro e nanoparticulados

Resumo

O Mineral Trióxido Agregado (MTA) apresenta o cimento Portland (CP) na sua composição básica. Aditivos e veículos podem ser adicionados ao CP para melhorar sua consistência e aplicabilidade clínica. O objetivo do presente estudo será avaliar propriedades biológicas de diferentes formulações do CP branco e suas modificações. Serão avaliados inicialmente o CP branco e diferentes CPs modificados por meio dos seguintes testes: Ensaio da enzima desidrogenase mitocondrial para avaliação da viabilidade celular por meio do teste MTT (Sigma Chemicals, St Louis, MO), morfologia celular por meio de corante violeta de cresilo, ensaio de apoptose/necrose pela metodologia de laranja de acridina/ brometo de etídio e ensaio cometa para avaliação de possíveis danos genotóxicos no DNA celular, além da avaliação da presença de metais pesados em espectrofotometria de absorção atômica. Serão selecionados dois dentre os materiais analisados para uma nova fase de avaliações. Nesta etapa, os materiais serão acrescidos de diferentes agentes radiopacificadores - óxido de zircônio, óxido de nióbio, óxido de zinco nas formas micro a nanoparticuladas e óxido de bismuto microparticulado. O MTA será usado como controle. Os testes de MTT e necrose/apoptose serão realizados a fim de avaliar a viabilidade das células após contato com materiais; para análise da morfologia celular, as células serão fixadas e coradas com violeta de cresilo, e a avaliação do ciclo celular será avaliada por citometria de fluxo; no teste para avaliação de fosfatase alcalina, essencial para o processo de mineralização, o kit Labtest será utilizado. Os depósitos de cálcio serão avaliados pelo corante Alizarin red e a bioatividade dos materiais acrescidos dos diferentes agentes radiopacificadores também será avaliada por meio da expressão gênica de marcadores moleculares de osteogênese. Os dados obtidos serão submetidos à análise de variância e teste de Tukey, com nível de significância 5%.