Estrutura molecular e citogenética de cromossomos B em Astyanax paranae (Characiformes, Characidae)

Resumo

Cromossomos B são elementos genômicos extras ao complemento cromossômico padrão e ocorrem em muitos organismos. Podem ter origens distintas, incluindo a derivação de cromossomos autossômicos e cromossomos sexuais e até como resultantes de cruzamentos entre espécies. Os mecanismos moleculares que norteiam a evolução desses segmentos se assemelham aos de cromossomos sexuais univalentes e podem envolver silenciamento gênico, processos de heterocromatinização, acúmulo de DNA repetitivo e transposons. O advento recente de técnicas citogenéticas mais resolutivas, como a microdissecção, método que possibilita o isolamento direto do DNA de qualquer região cromossômica, associada à técnica de hibridação in situ com corantes fluorescentes, tem proporcionado avanços no conhecimento da estrutura e composição destes elementos genômicos em um número significativo de organismos portadores de cromossomos B. O presente estudo se insere no programa geral de estudos de citogenética e genética molecular de peixes neotropicais em desenvolvimento no Laboratório de Biologia e Genética de Peixes (IBB/UNESP/BOTUCATU) e tem como objetivo principal a análise citogenética em nível molecular de peixes da espécie Astyanax paranae. O projeto terá por base a microdissecção dos cromossomos B (¼B-DNA) desta espécie, bem como a extração do DNA genômico (gDNA) e a amplificação por PCR de várias seqüências de DNA repetitivo (DNAr 45S e 5S, DNA telomérico e genes para as histonas H1, H3 e H4), além de elementos retrotransponíveis (Rex1, Rex3 e Rex6) em ambos os tipos de DNA extraídos (gDNA e ¼B-DNA). O desenvolvimento deste trabalho deverá apresentar um panorama das relações dos componentes moleculares dos cromossomos B com os dos cromossomos do complemento A, além do mapeamento cromossômico das sequências de vários DNAs repetitivos e de elementos transponíveis nos cromossomos dos representantes deste grupo. O objetivo principal neste estudo será contribuir para o conhecimento do conteúdo molecular dos cromossomos B em uma espécie de Astyanax e gerar informações que permitam esclarecer aspectos da origem deste tipo de segmento de DNA no genoma das espécies do gênero. (AU)