Desenvolvimento de um teste dipstick para o diagnóstico da leptospirose animal

Resumo

A leptospirose é uma doença bacteriana infecto-contagiosa, de curso agudo ou crônico, causada por espiroquetas do gênero Leptospira, de caráter zoonótico e cosmopolita que acomete o homem e os animais domésticos e silvestres. Pode ser transmitida de forma direta pelo contato com os fluidos (sangue ou urina) contendo leptospiras, através das vias transplacentária e hematogênica, genital e o ato de mamar; ou de forma indireta pelo contato com um ambiente contaminado com leptospiras originárias da urina de animais infectados, doentes ou convalescentes. O conhecimento da gravidade da infecção, da distribuição geográfica, dos fatores de risco envolvidos e das estirpes circulantes é de extrema importância para o estabelecimento da epidemiologia regional desta enfermidade e o aprimoramento de medidas preventivas. A informação sobre a epidemiologia da leptospirose se origina a partir dos resultados sorológicos obtidos através da Reação de Soroaglutinação Microscópica (SAM), prova de referência preconizada pela Organização Mundial da Saúde. No entanto, incoerências e limitações desta técnica de diagnóstico são evidentes. Embora a SAM estabeleça certo grau de especificidade sorogrupo/sorovar envolvido, este teste apresenta como desvantagem ser pouco sensível quando considerados o tempo e a elevada concentração de anticorpos necessários para a emissão do sinal. Além disto, muitas vezes, não é discriminatória de infecção pregressa, ativa ou reação vacinal. Portanto, a sorologia não reflete necessariamente o estado de portador ou eliminador de leptospiras. Outros métodos, como a técnica de PCR, também vêm sendo utilizados, aprimorando o diagnóstico precoce da doença. Porém, por PCR não se consegue obter as informações sobre a estirpe infectante de leptospira envolvida, dado epidemiológico importante para se identificar os reservatórios. O isolamento bacteriano é o diagnóstico definitivo da doença, entretanto este método apresenta baixa sensibilidade, necessitando de amostras recém colhidas que devem ser observadas por um período mínimo de 30 dias. Dessa forma, o desenvolvimento de métodos de diagnósticos mais simples, rápidos e eficientes se faz cada vez mais necessário. Neste trabalho, pretende-se avaliar a utilização de proteínas recombinantes de Leptospira spp. como antígenos no desenvolvimento de um teste rápido baseado em ensaio imunocromatográfico do tipo dipstick, como possível método diagnóstico da leptospirose. (AU)