Caracterização lipídica da membrana plasmática de espermatozóides caninos normo e astenospérmicos em diferentes fases da maturação espermática, no ejaculado e após criopreservação

Resumo

Estudos acerca da constituição lipídica da membrana plasmática do espermatozóide canino são escassos, o que dificulta o desenvolvimento de mecanismos protetores durante a manipulação in vitro. Os objetivos do presente experimento são: avaliar a composição lipídica da membrana plasmática de espermatozóides ejaculados móveis e estáticos, descrever a constituição da membrana plasmática espermática durante a maturação nos diferentes segmentos do epidídimo (cabeça, corpo e cauda) e detectar as alterações lipídicas da membrana plasmática após o processo de criopreservação. Ainda, é escopo deste experimento avaliar os lipídeos de membrana plasmática envolvidos na congelabilidade espermática de cães. Durante a primeira etapa experimental, 10 cães machos terão o sêmen colhido por massagem peniana. Uma alíquota do ejaculado será destinada à centrifugação por gradiente de densidade para a separação dos espermatozóides móveis e estáticos. O restante do ejaculado será criopreservado para posterior análise. O mesmo cão será submetido à orquiectomia para coleta de espermatozóides provenientes da cabeça, corpo e cauda do epidídimo. As amostras (epididimárias, do ejaculado e criopreservadas) serão submetidas à extração lipídica da membrana plasmática e posterior análise por espectrometria de massas para determinação da composição lipídica da membrana plasmática. Na segunda etapa do experimento, 20 cães terão o sêmen criopreservado e analisado quanto à motilidade e integridade de membrana após a descongelação. Os animais com melhor e pior congelabilidade espermática serão avaliados quanto à composição lipidica da membrana plasmática por espectrometria de massas, buscando os fatores lipidicos ligados à congelabilidade espermática em cães.