Detecção sorológica, molecular e caracterização dos Paramyxovirus aviários do tipo 1 (classe I e classe II) em aves silvestres

Resumo

O vírus da doença de Newcastle (NDV), também conhecido como paramyxovirus aviário do tipo 1 (APMV-1), é a principal preocupação econômica dos produtores de aves em todo o mundo. Recentemente, análises do tamanho dos genomas e sequências de genes revelaram dois clados distintos dos AMPV-1: classe I e II. Enquanto os isolados de classe I são recuperados a partir de amostras de aves silvestres e aves do comércio de aves vivas; os isolados de classe II são coletados principalmente a partir de aves domésticas nas formas virulentas. O entendimento da epidemiologia das infecções causadas pelos APMV-1 é dificultado pelo fato destas viroses não produzirem sinais clínicos e frequentemente não serem detectadas por métodos de diagnóstico rápidos. O presente estudo tem o objetivo de investigar a presença dos APMV-1 nas aves silvestres brasileiras através de testes moleculares e sorológicos. Para tanto, amostras (sangue e suabes) serão coletadas de 300 aves silvestres, principalmente aves aquáticas da família Anatidae nos estados de São Paulo e Rio Grande do Sul. Um teste de real time RT-PCR, (RT)²-PCR, para a detecção simultânea dos vírus de classe I e classe II será utilizado para detecção molecular em suabes. O multiplex (RT)²-PCR detectará os genes L e M das classes I e II, respectivamente. O teste será avaliado inicialmente através de amostras de referência e depois aplicado em suabes cloacais e orofaringeanos coletados de aves silvestres. Os genes da proteína da fusão (F) e da hemaglutinina-neuraminidase (HN) serão sequenciados. O sítio de clivagem da proteína F será utilizado para identificação da patogenicidade das amostras e as sequências de F e H-N serão utilizadas para comparar com outras sequências de APMV-1 através de análises filogenéticas. Finalmente, pela primeira vez no Brasil, um estudo visa a detecção dos anticorpos anti-APMV-1, que será realizada através de um ELISA de bloqueio comercial utilizando o sangue das aves. Esperamos aumentar o nosso conhecimento sobre a distribuição, diversidade genética e ecologia dos APMV-1 no Brasil através deste estudo. (AU)