Resistência de células de carcinoma epidermóide bucal à terapia fotodinâmica mediada pelo ácido 5-aminolevulínico

Resumo

O carcinoma epidermóide bucal (CEC) constitui uma neoplasia maligna de alta morbidade, com alto índice de recidiva e de resistência aos tratamentos convencionais. A terapia fotodinâmica (PDT) tem sido utilizada em casos iniciais de CEC, com índices promissores de remissão completa do tumor. Não se sabe, contudo, se as células de CEC podem desenvolver resistência à PDT, principalmente nas situações em que essa terapia é utilizada durante vários ciclos, com administração de doses subletais. O objetivo deste trabalho é verificar se células de CEC lingual humano desenvolvem resistência à PDT mediada pelo ácido 5-aminolevulínico (5-ALA), bem como se mecanismos de antiapoptose, de inibição do ciclo celular e controle da autofagia participam desse processo. Também será objetivo verificar se esses fenômenos estão presentes em lesões de CEC bucal induzidas em ratos e tratadas com PDT. Células SCC9 serão submetidas a ciclos repetidos com doses crescentes de PDT mediada pelo 5-ALA, até exibirem aumento de viabilidade em relação àquela observada nas doses iniciais. Será realizada quantificação do índice de apoptose e de proteínas ligadas a mecanismos de antiapoptose (iNOS, NFkB, Mcl-1, bcl-2 e survivina), de modulação do ciclo celular (IKK, Akt e ciclina D1) e de inibição da autofagia (mTOR). Será realizada também administração de celecoxibe nos clones celulares resistentes, com o intuito de verificar se essa droga promove a inibição das proteínas citadas e, consequentemente, incrementa a eficácia da PDT. Lesões de CEC bucal serão induzidas em ratos a partir da administração de 4-NQO na água de beber. As lesões serão tratadas com um ciclo de PDT mediada pelo 5-ALA. Testes imuno-histoquímicos das proteínas citadas serão realizados, analisando-se a expressão protéica nas células neoplásicas que resistiram a PDT. Espera-se elucidar se é possível induzir a formação de células de CEC resistentes à PDT, bem como se o celecoxibe exerce efeito sinérgico sobre essa terapia, aumentando sua eficácia nessas situações. (AU)