Nanopartículas contendo o antígeno PspA (Pneumococcal surface protein A) como vacina contra pneumonia pneumocócica

Resumo

Streptococcus pneumoniae é um importante patógeno humano, causando diversas doenças graves como meningite, pneumonia, bacteremia e sepse. As vacinas atualmente disponíveis são baseadas na resposta contra o polissacarídeo capsular, mas apresentam algumas desvantagens, como o elevado custo e cobertura restrita aos sorotipos contidos nas vacinas. O uso da vacina conjugada polissacarídica 7-valente resultou em uma drástica redução de doença invasiva causada por sorotipos vacinais, mas houve uma rápida substituição por sorotipos não-vacinais. Além disso, essas vacinas apresentam uma eficácia bem mais baixa contra doenças não-invasivas, incluindo pneumonia. Desse modo, o desenvolvimento de novas vacinas contra pneumococo continua sendo uma prioridade e estratégias alternativas estão sendo avaliadas, como o uso de antígenos proteicos. Diversas proteínas recombinantes expressas em Escherichia coli estão sendo estudadas atualmente como antígenos vacinais, destacando-se PspA (Pneumococcal surface protein A). PspA apresenta variabilidade em diferentes isolados e nosso grupo havia demonstrado que algumas variantes de PspA são capazes de induzir anticorpos com maior reatividade cruzada com as diferentes linhagens de pneumococo. Demonstramos ainda a capacidade dessas variantes de PspA em induzir proteção em modelos de desafio intranasal letal e de colonização da nasofaringe de camundongos. Propomos testar agora a eficácia de uma formulação baseada em nanopartículas apresentando PspA contra pneumonia pneumocócica. A vacina será administrada na forma de pó diretamente no pulmão de camundongos através da utilização de um insuflador pulmonar. A utilização de uma formulação na forma de pó reduziria bastante o custo da vacina, já que o transporte poderia ser feito à temperatura ambiente sem necessidade de uma cadeia de refrigeração. Para imunização, será utilizado PspA adsorvido em nanopartículas baseadas em PGA-co-PDL (poli(glicerol adipato-co-É-pentadecalactona), um poliéster biodegradável. As nanopartículas serão formuladas em carregadores microparticulados, adequados à inoculação pulmonar com insuflador. Espera-se que as nanopartículas possam apresentar o antígeno eficientemente a células dendríticas do pulmão, conferindo proteção contra pneumonia. A indução de resposta imune será avaliada através da dosagem de anticorpos no soro e no pulmão, além da análise da produção de citocinas por células do pulmão e baço de animais imunizados e estimulados in vitro com o antígeno PspA. A eficácia da imunização na proteção contra pneumonia será avaliada através de dois modelos de desafio intranasal: o primeiro causa pneumonia não-invasiva e o segundo causa pneumonia seguida de invasão e morte.