Estudo da sensibilidade às espécies reativas de oxigênio durante a maturação espermática em cães

Resumo

Atualmente, diversos estudos tem como foco a compreensão da fisiologia da maturação espermática em cães, contudo, o desconhecimento da suscetibilidade dos espermatozoides epididimários à ação dos radicais livres impossibilita a utilização de agentes antioxidantes no diluidor para criopreservação de tais amostras. O objetivo do presente experimento é avaliar suscetibilidade dos espermatozoides da cabeça, corpo e cauda do epidídimo de cães às espécies reativas de oxigênio. Dez cães machos serão submetidos à orquiectomia. Após a castração, os epidídimos serão armazenados a 5°C e o sêmen será recuperado em até 24 horas. As amostras serão obtidas das 3 regiões do epidídimo: cabeça, corpo e cauda. As amostras serão divididas e incubadas a 37ºC por 30 minutos em 5 tratamentos: ânion superóxido (O2-), peróxido de hidrogênio H2O2, radical hidroxil (OH-), malondialdeído e controle. Após o término da incubação as amostras serão submetidas à análise computadorizada da motilidade espermática (CASA), integridade de membrana plasmática (Eosina/Nigrosina), integridade acrossomal (Fast green/Rosa bengala), atividade mitocondrial pela avaliação da oxidação da 3,3'-diaminobenzidina (DAB) e análise do estresse oxidativo por meio da avaliação das espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico. Os resultados serão avaliados pelo programa SAS System for Windows (SAS, 2000) considerando p<0,05.