Estresse celular e sua relação com a cinética de desenvolvimento de embriões bovinos produzidos in vitro

Resumo

A produção in vitro de embriões bovinos ainda é considerada uma biotecnologia de baixa eficiência, uma vez que a técnica apresenta, em média, menor taxa de prenhez quando comparada à produção in vivo. Embora o sistema de cultivo in vitro (CIV) tente mimetizar o que ocorre in vivo, os embriões da CIV acabam sendo expostos a diversos fatores de estresse que normalmente não sofreriam no interior do trato reprodutivo. Além de fatores intrínsecos como a própria produção de energia para sustentar os eventos do desenvolvimento, fatores de estresse ambiental ocasionados por um sistema não otimizado de cultivo também podem prejudicar o desenvolvimento embrionário. É o caso da manutenção da homeostase oxidativa, que se não for mantida pode fazer com que a produção de ATP e a síntese proteica entrem em colapso. Para a otimização do processo de cultivo é necessário conhecer a que tipos de condições estressoras estes embriões estão submetidos no sistema in vitro e como os embriões de características distintas respondem a essas condições de estresse. Por esta razão, acreditamos que seja de extrema relevância a investigação de mecanismos moleculares que relacionem a competência do embrião aos estressores existentes na produção in vitro. Além disso, combinação de técnicas moleculares e avaliações bioquímicas e morfológicas podem fornecer biomarcadores da resposta embrionária ao estresse, de forma que nos permita desenvolver estratégias alternativas para a modulação e para a reformulação empírica dos métodos de cultivo visando sua otimização e a seleção de embriões de melhor qualidade e viabilidade. Com base no exposto os objetivos deste projeto é avaliar ao longo do cultivo de embriões bovinos PIV de diferentes cinéticas de desenvolvimento (rápido e lento) mantidos sob condições estressoras no sistema de cultivo (estresse glicêmico e oxidativo) o padrão de consumo de substratos energéticos (glicose, lactato, piruvato e glutamato); a atividade mitocondrial e a produção intracelular de espécies reativas de oxigênio; os produtos da peroxidação lipídica no meio de cultura; o padrão de expressão de genes relacionados a diferentes vias de resposta ao estresse celular e correlacionar os dados com a cinética de desenvolvimento de embriões produzidos in vitro. (AU)