Caracterização biofísica da hemoproteína do anelídeo Amythas gracilis e seu potencial uso como biossensor de contaminação ambiental

Resumo

As hemoproteinas constituem um grupo de proteínas que desempenham um papel vital nos organismos. Dentro deste grupo podemos citar a mioglobina, hemoglobina intracelular e citocromo c, os quais são intensivamente estudados, sendo que o interesse de vários grupos de pesquisa em hemoglobinas extracelulares é relativamente recente. A importância em se estudar as hemoglobinas extracelulares gigantes está relacionada com sua alta estabilidade oligomérica, resistência à oxidação, alta cooperatividade e alta afinidade para ligar oxigênio, além do potencial uso em aplicações biomédicas como substituto sanguíneo. Tais propriedades tornam as hemoglobinas extracelulares bastante singulares e interessantes para estudos com aplicações biotecnológicas. O presente projeto de pesquisa, na categoria de jovem pesquisador, tem como objetivo realizar estudos de caracterização estrutural e da estabilidade da hemoglobina extracelular gigante extraída do anelídeo Amynthas gracilis (HbAg) e avaliar o seu potencial uso como biossensor de contaminação ambiental. Inicialmente serão estudadas as propriedades biofísicas da HbAg, tais como, a estabilidade térmica, a dissociação e/ou desnaturação, em diferentes valores de pH, mudanças estruturais na presença de agentes caotrópicos, além de avaliarmos as interações da HbAg com metais e pesticidas. Várias técnicas espectroscópicas, tais como, absorção ótica, fluorescência estática, dicroísmo circular, espalhamento dinâmico de luz (DLS), e estruturais, espalhamento de raios X a baixo ângulo (SAXS), ultracentrifugação analítica (AUC) e espectrometria de massas MALDI-TOF-MS e absorção atômica serão utilizadas. Uma vez caracterizada, a HbAg será imobilizada em superfícies sólidas através da preparação de filmes automontados e seu potencial como biossensor para a detecção de metais/pesticidas que contaminam o solo será explorado. (AU)